[发明专利]一种同时测定金银花中六种环烯醚萜苷类成分的方法

摘要

本发明公开了一种同时测定金银花中六种环烯醚萜苷类成分的方法，首次基于DSPE‑HPLC法同时检测金银花中六种不同结构环烯醚萜苷类成分即马钱酸、莫诺苷、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷、开联番木鳖苷二甲基乙缩醛，使用该方法线性相关系数均大于0.999，检出限为0.026‑0.057μg/mL，各目标成分回收率在90.5‑102.1％之间，相对标准偏差(RSD)在0.85‑1.74％范围内，具有有机溶剂用量少、净化和浓缩效果好、目标物回收率高、灵敏度高易操作等特点。本发明发展了一套适合对金银花等药材中环烯醚萜苷类成分的快速、高效的提取、净化和分析方法，为对进一步研究其作用机制、建立质量标准，提高药材及相关成药质量控制水平，指导临床应用具有重要意义。

主权项

1.一种同时测定金银花中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，测定的六种环烯醚萜苷类成分分别是马钱酸、莫诺苷、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷和开联番木鳖苷二甲基乙缩醛，测定步骤如下：（1）将金银花粉碎，过筛，称取一定量金银花粉待用；（2）向步骤（1）中的金银花粉中加入提取溶剂，摇匀后进行超声提取得上清液；（3）向步骤（2）中的上清液中加入净化剂，涡流振荡；（4）经步骤（3）处理后的上清液用微孔滤膜过滤得提取液；（5）分别精密称取马钱酸、莫诺苷、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷、开联番木鳖苷二甲基乙缩醛对照品，加甲醇溶解，制成混合标准溶液；使用时，按一定比例逐级稀释，待用；（6）将步骤（4）得到的提取液进行高效液相色谱分析，色谱条件如下：色谱柱：Kromasil C18，4.6×250 mm，5μm；流速：0.8 mL/min；检测波长：240 nm；柱温：25℃；流动相：流动相为0.3%甲酸水和水，梯度洗脱；所述梯度洗脱程序如下：0～15 min，10%～14%乙腈；15～35 min，14%～25%乙腈；35～45 min，25%～50%乙腈；45～50 min，50%～100%乙腈；50～65 min，100%乙腈；（7）以外标法进行金银花中六种环烯醚萜苷类成分的定量分析，即以已知浓度的环烯醚萜苷类的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，对提取液进行测定，测得检出提取液中六种环烯醚萜苷类成分的色谱峰面积，代入标准曲线，求得金银花中马钱酸、莫诺苷、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷和开联番木鳖苷二甲基乙缩醛的含量。