[发明专利]一种制备具有肠道益生功能的茯砖茶茶多糖的方法

摘要

本发明涉及一种制备具有肠道益生功能的茯砖茶茶多糖的方法。该方法包括采用80％乙醇脱色后经干燥、粉碎、热水浸提、乙醇沉淀、复溶、DEAE Sepharose Fast Flow树脂脱色、透析、浓缩、冷冻干燥得茯砖茶茶多糖。体外厌氧发酵实验表明茯砖茶茶多糖具有肠道益生功效。本发明制备茯砖茶茶多糖，具有利用率高、脱色效果好、工艺温和不破坏茶多糖活性等优点，为开发利用茯砖茶茶多糖开辟了新的途径。

主权项

一种制备具有肠道益生功能的茯砖茶茶多糖的方法，其特征在于包括以下操作步骤：(1)将茯砖茶粉碎过60目筛然，用80％酒精去除色素及多酚数次去除茯砖茶中色素后晾干；(2)以料液比为5‑30mL/g在60‑100℃水中提取三次，离心后合并提取液，浓缩，加入三倍体积无水乙醇进行醇沉，在4℃条件下醇沉过夜，过滤，收集沉淀；(3)取步骤(2)中的沉淀溶解去离子水中，采用Sevage法去除样品中蛋白后冷冻干燥，得茯砖茶茶多糖粗品；(4)取步骤(3)中的粗多糖溶解去离子水中离心后上样于DEAE Sepharose Fast Flow柱进行脱色，用1M的NaCl进行洗脱，流速为2mL/min，利用苯酚‑硫酸法检测洗脱液中多糖含量，收集多糖组分，经过透析、旋转蒸发浓缩后冷冻干燥得到茯砖茶茶多糖；(5)将步骤(4)所得茶多糖进行体外厌氧发酵，测定其体外厌氧发酵过程pH变化、短链脂肪酸生成量及肠道菌群变化进而评价茯砖茶茶多糖的肠道益生功能。制备的茯砖茶茶多糖在体外厌氧发酵中浓度为10mg/mL时，与空白组相比茯砖茶茶多糖可以降低厌氧发酵体系的pH值，促进乙酸、乳酸、丙酸和丁酸的生成，并且在厌氧发酵12h和24h后促进体系中双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳杆菌属‑乳酸球菌属(Lactobacillus‑Enterococcus)及菌群总数增加。