[发明专利]一种礁膜孢子集块化的培养方法

摘要

本发明公开了一种礁膜孢子集块化的培养方法，具体步骤如下：步骤一，礁膜前处理；步骤二，孢子放散；步骤三，孢子收集；步骤四，集块化法培养。本发明解决了礁膜渡夏过程中的保存问题；本发明的培养方法稳定性高，可控性强，有效解决了大面积推广所需种源问题；本发明的培养方法可缓解种质退化问题，相比较传统养殖，悬浮培养采收容易,可节省人力物力，使用效果好。

主权项

一种礁膜孢子集块化的培养方法，其特征在于，具体步骤如下：步骤一，礁膜前处理：挑选颜色健康并且藻体完整的礁膜，然后用灭菌海水冲洗2‑6次，去除表面的附着物，培养于20℃，光强为100μmol/m2s，光照周期为12h/12h的无菌海水中并且添加质量分数为0.05％的营养液；步骤二，孢子放散：待培养礁膜几乎处于同一生长状态时，使用无菌刀片将其切断至5‑10mm，用无菌纯水冲洗3‑8次，然后培养于25℃，光强为100μmol/m2s，光照周期为12h/12h，海水盐度为10‑15ppt无菌人工海水中并且添加质量分数为0.05％的营养液；步骤三，孢子收集：孢子大量迅速释放后，使用拉丝后的移液器(针孔允许孢子通过)，吸取孢子，并置于无菌12或24孔的培养板，培养板中添加含有质量分数为0.05％的营养液的无菌人工海水，重复2‑5次上述步骤，直至达到期望的孢子浓度，然后立即进行24‑36h的暗处理；步骤四，集块化法培养：暗处理后的孢子立即更换新鲜培养液，然后培养于20℃，光强为100μmol/m2s，光照周期为12h/12h的无菌海水中，无菌海水中添加有质量分数为0.05％的营养液，待藻体长至1mm以上，用无菌解剖刀轻轻刮取附着的藻苗，使用目数为200‑300目的筛网过滤，将藻苗转至无菌三角瓶中，无菌三角瓶中存有添加0.05％营养液的无菌海水，无菌三角瓶密封通气培养，每3天更换一次培养液，即可得到成品。