[发明专利]小黄鱼雌鱼与大黄鱼雄鱼杂交育种方法

摘要

小黄鱼雌鱼与大黄鱼雄鱼杂交育种方法，属于水产养殖海水鱼类苗种繁育技术领域。其包括以下步骤：1）亲本选择与培育；2）人工催产授精：a、人工催产；b、人工挤卵、采精；c、人工干法授精；d、洗卵；3）苗种孵化管理；4）仔稚鱼和幼鱼的培育。通过本发明的方法进行小黄鱼与大黄鱼杂交，能够培育出生长快、品质优良的新品种，并且该新品种的受精率可达到65%以上，孵化率达到92%以上，在生产上具有重要的应用价值，推动了我国水产养殖业的健康发展。

主权项

1.小黄鱼雌鱼与大黄鱼雄鱼杂交育种方法，其特征在于包括以下步骤：a亲本选择与培育在杂交前一年冬季，选用9月龄全长20cm以上、体质量50g以上，形态、体色均正常、健康无伤的小黄鱼作为杂交母本，选用2龄以上全长30cm以上、体质量300g以上，形态、体色正常、健康无伤的大黄鱼作为杂交父本，分别放在不同的水泥池中进行强化培育，培育期间投喂以鲜活沙蚕为主的饵料，每公斤饵料含有：维生素C1‑3‰、维生素E0.2‑0.5‰、复合维生素1‰、DHA1.5%、卵磷脂1.5%和鲜活沙蚕余量；日投喂2次，日投喂量为鱼体体重的1.5%；亲鱼培育期间，亲鱼池中连续充气、流水培育，换水量300%，定时清池换水；及时清除残饵、排污；水质条件：DO≥6.0mg/L，pH 7.6‑8.5，盐度26‑28；当自然水温达到12℃时，此时开始对大黄鱼和小黄鱼进行控温；控温方式：每2d水温缓慢升高1℃，达到16℃时，小黄鱼培育池维持此温度不变；大黄鱼亲鱼培育池达到20℃时，维持水温不变，定期观察亲鱼性腺发育情况；b人工催产授精：包括：（1）人工催产；（2）雌鱼挤卵、雄鱼采精；（3）人工干法授精；（4）洗卵；（1）人工催产：对性腺发育良好的小黄鱼亲鱼进行人工催产，催产剂：LRH –A2 0.25ug+HCG100IU/kg鱼体重；对大黄鱼雄鱼进行人工催产，催产剂：LRH –A3 1.25ug/kg鱼体重；注射催产剂后将雌雄亲鱼分别放入0.5 m³亲鱼培育桶，小黄鱼每桶20尾；大黄鱼每桶10尾；流水刺激促使发情排卵产精；（2）人工挤卵、采精：催产后36h后开始每隔2h检查一次，当轻压小黄鱼腹部有卵子流出时说明卵子发育成熟，此时开始进行人工挤卵：捞出小黄鱼亲鱼，用干毛巾擦拭生殖孔，手轻轻挤压腹部，用1000mL塑料烧杯收集卵子等待受精；然后捞出大黄鱼雄鱼，同样用干毛巾擦拭生殖孔去除海水，然后边挤压边用塑料吸管采集精液；（3）人工干法授精：将精液滴入装有卵子的烧杯中，精液与卵子配比1mL精液：200mL卵子，并用玻璃棒轻柔搅拌，使精卵混合均匀，向其中加16±0.5℃清新海水50mL激活精子，用玻璃棒缓慢搅动1‑2min后加1000mL水温为16±0.5℃的海水，用玻璃棒搅动30s，受精完成后将烧杯静置5min，分别收集漂浮于上层的受精卵和下层的未受精卵，计算受精率；（4）洗卵：把收集的优质受精卵倒入筛绢缝制专用洗卵的手抄网中，放入添加了少量聚维酮碘的16±0.5℃海水中进行杀菌，随后用海水清洗3遍，把洗好的受精卵倒入孵化桶中孵化；c苗种孵化管理：孵化桶为上部圆柱形，下部漏斗形，底部充气，容积0.2m³；每桶布卵量为30mL，孵化桶水温16±0.5℃，盐度26‑28，DO≥6mg/L, pH 7.8‑8.5，光照300‑500Lux，每天早、中、晚三次采用虹吸法吸出沉于底部的未孵化受精卵，受精卵经40h孵化达到膜内仔鱼期，此时将受精卵转移到1m³苗种培育桶中进行培育；d仔稚鱼和幼鱼的培育：每个培育桶中投放受精卵20mL，前3天静水培育，培育池初始水深500‑600mm,从第4d开始每天加水100mm，至800‑900mm，第6日龄时开始换水，每天上午和下午各换水一次，初始换水量为10%，每隔3天增加换水量10%，逐渐增加到100 %；1‑15日龄微充气；第16日龄时改为常流水，流水速率为50L/h，充气量增大；仔鱼孵出后第3d开始投喂L型褶皱臂尾轮虫，上下午各一次，投喂密度8‑10 ind/mL，同时投喂浓缩小球藻，密度 1.5×10⁶cells/mL；鱼苗孵化后第7天进行一次清底，此后每隔4天清底一次；12日龄开始增加投喂卤虫无节幼体，卤虫无节幼体密度1‑2ind/mL，轮虫保持5‑6 ind/mL，先投喂卤虫无节幼体，半小时之后再投喂轮虫，日投喂2次；15日龄停止投喂轮虫，开始进行人工配合饲料的驯化，先少量投喂鱼宝2号饲料，半小时之后再投喂卤虫，卤虫密度3‑4ind/mL；随着苗种长大，卤虫密度逐渐降低，配合饲料投喂量逐渐增加；20日龄时，对苗种进行一次分苗，每个培育桶苗种数量均保持在1200‑1500尾；30日龄之后彻底停喂卤虫，全部投喂鱼宝2号饲料，根据苗种生长情况更换颗粒直径较大的饲料进行投喂；仔鱼达到40日龄时根据每个培育桶中密度进行适当分桶、分苗，每桶苗种数量800‑1000尾；稚鱼达到60日龄时根据每个培育桶中密度进行适当分桶、分苗，每桶苗种数量400‑500尾；直至稚鱼体表完全被鳞，然后转入水泥池进行大规格鱼种、成鱼养殖。