[发明专利]一种肝靶向阳离子聚合物及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及一种肝靶向阳离子聚合物及其制备方法与应用。肝靶向阳离子聚合物，由BUCT‑PGEA侧链无规则地连接于普鲁兰主链上构成。本发明还涉及肝靶向阳离子聚合物的制备方法与应用。本发明首次公开了利用制备的PuPGEA共运载MEG3和P53基因所形成的纳米复合物在HepG2和SMMC7721细胞中显示出比载有单独的pcDNA‑MEG3和pcDNA‑P53的复合物更高的抗癌活性，证明MEG3和P53的共传递对体外HCC细胞的生长有附加效应。

主权项

1.肝靶向阳离子聚合物PuPGEA在制备传递pcDNA‑MEG3和/或pcDNA‑P53的纳米复合药物中的应用，其特征在于，所述肝靶向阳离子聚合物，由BUCT‑PGEA侧链无规则地连接于普鲁兰主链上构成，结构式如下所示：式中：m为3～4，n为89～94，x为14～18；肝靶向阳离子聚合物的制备方法，步骤如下：（1）将普鲁兰多糖3 g和4‑二甲氨基吡啶0.15 g完全地溶于无水二甲基甲酰胺30 mL之后，在冰浴和搅拌的条件下加入2‑溴代异丁酰溴0.148 mL的无水二甲基甲酰胺 0.6 mL溶液；然后将体系转移到常温下反应24小时，再通过透析和冻干得到作为聚合的引发剂的溴代异丁基功能化的普鲁兰；（2）将80 mg的溴代异丁基功能化的普鲁兰投入到无水二甲基亚砜2 mL中，将甲基丙烯酸缩水甘油酯0.8 mL、溴化亚铜和2,2’‑联吡啶以100:1:3的摩尔比加入到上述无水二甲基亚砜中，通过鼓泡的方式通入氮气20分钟后密封，再在常温下反应10分钟，再用40倍体积的甲醇将无水二甲基亚砜中的聚合物沉淀出来，并在真空下抽干，制得数均分子量约30 kDa的普鲁兰‑g‑聚甲基丙烯酸缩水甘油酯；（3）将250 mg步骤（2）制得的普鲁兰‑g‑聚甲基丙烯酸缩水甘油酯溶解于无水二甲基亚砜16 mL中，再加入10倍体积的乙醇胺，在80℃下反应0.7小时，然后透析和冻干，制得数均分子量约36 kDa的肝靶向阳离子聚合物PuPGEA；肝靶向阳离子聚合物PuPGEA与pcDNA‑MEG3的纳米复合药物的制备方法，步骤如下：将由无菌去离子水配制成氮浓度为10 mM的肝靶向阳离子聚合物PuPGEA溶液，然后与pcDNA‑MEG3溶液按体积比1:1的比例混合，在25℃下培养30分钟，制得纳米复合药物PuPGEA/MEG3，N/P比为10；肝靶向阳离子聚合物PuPGEA与pcDNA‑P53的纳米复合药物的制备方法，步骤如下：将由无菌去离子水配制成氮浓度为10mM的肝靶向阳离子聚合物PuPGEA溶液，然后与pcDNA‑P53溶液按体积比1:1的比例混合，在25℃下培养30分钟，制得纳米复合药物PuPGEA/P53，N/P比为10；肝靶向阳离子聚合物PuPGEA与pcDNA‑MEG3和pcDNA‑P53的纳米复合药物的制备方法，步骤如下：将由无菌去离子水配制的氮浓度为10mM的肝靶向阳离子聚合物PuPGEA溶液与pcDNA‑MEG3和pcDNA‑P53的混合溶液按体积比1:1的比例混合，pcDNA‑MEG3和pcDNA‑P53的质量比为2:1，在25℃下培养30分钟，制得纳米复合药物PuPGEA/ (MEG3+P53)，N/P比为10。