[发明专利]一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法

摘要

本发明涉及一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法，属于分析化学技术领域。本发明采用脱脂棉收集唾液样品、经离心和固相萃取后，采用气相色谱‑质谱联用法测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质。其步骤包括：a.用脱脂棉采集唾液样品，采集完后脱脂棉置于注射器针筒中，利用注射器推杆推移挤压得到唾液样品，经高速离心后取上清液；b.唾液样品加入内标物，依次经固相萃取柱富集、溶剂洗脱；c.洗脱液浓缩后复溶，过微孔滤膜，然后采用气相色谱‑质谱联用法测定，制作标准曲线，内标法定量。本发明方法可以有效的用于测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质，方法可行，检出限低，精密度好，准确可靠，具有推广应用价值。

主权项

1.一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤（1），样品采集：将脱脂棉置于口腔内，放置0.2‑5 min后，取出吸收了唾液的脱脂棉，置于注射器针筒中，利用注射器推杆推移挤压，挤出液收集于离心管中，经高速离心后收集上清液得到唾液样品；步骤（2），萃取：移取唾液样品，向唾液中加入内标物吡啶‑D5，内标物加入量为使最终样品复溶溶液中内标物浓度为0.5‑5 mg/L，然后转移至固相萃取柱，吡嗪类和吡啶类物质经固相萃取柱吸附，再经溶剂洗脱，最后收集洗脱液；其中，固相萃取柱为硅胶固相萃取柱、氨基固相萃取柱或HLB固相萃取柱；洗脱时采用二氯甲烷对含有内标物的唾液样品进行洗脱；步骤（3），测定：将步骤（2）收集到的洗脱液，经浓缩至近干后，用1‑2 mL甲醇复溶，过0.22 μm微孔滤膜，滤液采用气相色谱‑质谱联用法分析，内标法定量，根据标准曲线计算目标物含量；所述的浓缩温度为30‑40℃；气相色谱条件如下：色谱柱为长度×内径×膜厚为30 m×0.25 mm × 0.25 μm，INNOWAX石英毛细管柱；载气氦气，纯度≥99.999%，恒流模式，流量1.0 mL/min；进样口温度：250℃；分流进样或不分流进样，分流进样时分流比1‑30；进样量：1‑2 μL；程序升温：初始温度50℃，保持 1 min，然后以5℃/min升温到130℃，再以20 ℃ /min 升温到230℃，保持10 min；质谱条件如下：电离方式为电子轰击源，色谱质谱接口温度为250℃，离子源温度为180‑250℃，电离能量为70 eV，溶剂延迟：4.0 min，选择离子监测模式；所述的吡嗪类物质为2‑甲基吡嗪、2,5‑二甲基吡嗪、2,6‑二甲基吡嗪、2,3‑二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪；所述的吡啶类物质为吡啶、2‑丙基吡啶、3‑乙基吡啶、5‑乙基‑2‑甲基吡啶。