[发明专利]一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法

摘要

本发明涉及一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法，属于分析化学技术领域，具体涉及一种专用于分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法。本发明采用脱脂棉收集唾液样品，经溶剂萃取后采用气相色谱‑正化学源‑飞行时间质谱法测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质。其步骤包括：a.用脱脂棉采集唾液样品，采集后脱脂棉置于注射器针筒中，利用注射器推杆推移挤压得到唾液样品；b.唾液样品经溶剂萃取，离心，浓缩；c.萃取液过微孔滤膜后，滤液采用气相色谱‑正化学源‑飞行时间质谱法测定，制作标准曲线，外标法定量。本发明可以有效的用于测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质，方法可行，定性准确，检出限低，精密度好，准确可靠，具有推广应用价值。

主权项

1.一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤（1），样品采集：将脱脂棉置于口腔内，放置0.2‑5 min后，取出吸收了唾液的脱脂棉，置于注射器针筒中，利用注射器推杆推移挤压，挤出液收集于样品管中，得到唾液样品；步骤（2），萃取：移取唾液样品于离心管中，加入萃取溶剂、盐和除水剂，经涡旋振荡至混合均匀后离心，取萃取液层，得到萃取液，所述的萃取液中不含水；所述的萃取溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯和乙腈中的一种或几种的组合物，萃取溶剂加入量与唾液样品的体积比为0.2‑2：1；所述的盐为氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸氢二钠中的一种或几种的组合物，盐的加入质量为唾液样品质量的10‑40%；所述除水剂为无水硫酸镁、无水硫酸钠中的一种或两种的组合物，除水剂加入质量为唾液样品质量的0‑70%；步骤（3），测定：将步骤（2）收集到的萃取液过0.22 μm微孔滤膜，滤液采用气相色谱‑正化学源‑飞行时间质谱法分析，外标法定量；其中，气相色谱条件如下：色谱柱为长度×内径×膜厚为30 m×0.25 mm × 0.25 μm，DB‑35MS石英毛细管柱；载气氦气，纯度≥99. 999 %，恒流模式，流量1.0 mL/min；进样口温度：280℃；分流进样或不分流进样，分流比1‑30；进样量：1‑2 μL；程序升温：初始温度35℃，保持 2 min，然后以7.5℃/min升温到125℃，再以25 ℃/min 升温到280℃，保持5 min；飞行时间质谱条件如下：电离方式为正化学电离源，色谱质谱接口温度为280℃，离子源温度为160‑220℃，电离能量为40‑60 eV，溶剂延迟：4.0‑6.0 min，反应气为甲烷，流量为40‑60%，采集方式为总离子流色谱图；所述的吡嗪类物质为2‑甲基吡嗪、2,6‑二甲基吡嗪、2,3‑二甲基吡嗪、三甲基吡嗪和四甲基吡嗪；所述的吡啶类物质为吡啶、3‑乙基吡啶和5‑乙基‑2‑甲基吡啶。