[发明专利]从贻贝中提取天然牛磺酸的方法

摘要

本发明涉及从贻贝中提取天然牛磺酸的方法，属于化学提取技术领域。本发明从贻贝中提取天然牛磺酸的方法包含下列步骤：S1利用贻贝制备含牛磺酸的清液；S2将所述清液除蛋白；S3将所述步骤S3的产品进行分离纯化。本发明的有益效果为：原料取用大连地区最普遍贻贝作为原料，价格低廉，属于低端海产品，和方式提取，不存在环境污染的问题。且工艺操作简单，产量大。采用从含牛磺酸量最高的海产品中提取，温继而经过一列的操作后，无有机溶剂残留，做到天然提取。

主权项

1.从贻贝中提取天然牛磺酸的方法，其特征在于，包含下列步骤：S1利用贻贝制备含牛磺酸的清液；S1.1将贻贝清洗去壳取出贻贝肉；S1.2将贻贝肉放入到组织捣碎机中匀浆；S1.3将匀浆后贻贝肉称重并用3倍质量的水稀释；S1.4调节pH值至中性；S1.5放入恒温培养箱里进行水提取；S1.6将水提取产物进行过滤，取滤液；在将所述清液除蛋白前，使用超声波破碎仪进行破碎，对匀浆液进行过滤，取滤液；取破碎好的匀浆液30ml，向其中加入0.5g中性木瓜蛋白酶，混匀后调节pH=5.5，放入60℃的恒温水浴 锅中，静置20min，中间搅动几次，将提取完成的匀浆液，放入100摄氏度的水浴锅中加热15min，使木瓜蛋白酶在高温作用下失去活性；S2将所述清液除蛋白；S2.1除酸性蛋白；所述步骤S2.1除酸性蛋白采用盐酸将所述步骤S1产物的pH调至3‑4，然后在4500r/min下离心20分钟，并收集上清液；S2.2除碱性蛋白；所述步骤S2.2除碱性蛋白采用氢氧化钠将所述步骤S2.1的产物的pH调至9‑10，在4500r/min下离心20分钟，收集上清液；每100mL收集的上清液中加入2～3g的活性炭进行脱色，将过滤后的溶液pH用5% HCl调节至4.5；S3 将所述步骤S2的产品进行分离纯化；吸取收集的溶液注入强酸性阳离子树脂交换柱，吸取8.0mL收集的溶液注入7cm×60cm强酸性阳离子树脂交换柱，并采用蒸馏水进行洗脱，洗脱速度在2mL/min,收集吸吸光度最高峰值0.55左右的部分流出液；步骤S4 提取量的测定；采用甲醛‑乙酰丙酮法测定牛磺酸的提取量，取1mL流出液或其稀释液，加1mol/L醋酸钠溶液8mL，加入1mL甲醛‑乙酰丙酮作为显色剂，配制10mL溶液，在100℃水浴中保温15分钟，冷却至室温，在400 nm波长处测定吸光度，通过牛磺酸标准溶液吸收曲线确定牛磺酸的提取量；步骤8：检测结晶；采用紫外分光光度法检测含有牛磺酸的组分，将其放到4℃冰箱中放置2h，得到牛磺酸粗品结晶，将粗品重新溶解于水，过滤后，再加入无水乙醇，放置于4℃重结晶，将固液进行分离，如此结晶，再反复重结晶，即可得到纯的牛磺酸晶体。