[发明专利]一种4-氰基吡啶中3-氰基吡啶、4-甲基吡啶的高效液相色谱检测方法

摘要

本发明公开了一种4‑氰基吡啶中3‑氰基吡啶、4‑甲基吡啶的高效液相色谱检测方法：（1）制备系统适用性溶液；（2）制备供试品溶液；（3）制备对照溶液；采用高效液相色谱分别对系统适用性溶液、供试品溶液和对照溶液进行检测，检测条件为：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为A为改性缓冲盐20mmol磷酸二氢钾+2.4ml三乙胺到1000ml水中，用磷酸调节PH值至6.0～8.0，B相为有机相采用梯度洗脱；流速0.5～1.5ml/min；柱温为10℃～40℃；检测波长200～300nm；进样体积10µl；本发明检测方法中3‑氰基吡啶、4‑氰基吡啶和4‑甲基吡啶分离度均在2.0以上，理论塔板数高，对称性好，有效地避免了各组分之间的干扰影响检测结果的准确性；同时，本发明检测方法具有检测结果准确可靠、分析时间短，操作简便等优点。

主权项

1.一种4‑氰基吡啶中3‑氰基吡啶、4‑甲基吡啶的高效液相色谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备系统适用性溶液：取3‑氰基吡啶、4‑氰基吡啶、4‑甲基吡啶适量，用有机溶剂稀释制成每1ml中含4‑氰基吡啶为0.5mg～1.5mg，含3‑氰基吡啶为5μg～15μg，含4‑甲基吡啶为5μg～15μg的溶液，作为系统适用性溶液；(2)制备供试品溶液：取4‑氰基吡啶适量，用有机溶剂稀释制成每1ml中含4‑氰基吡啶为0.5mg～1.5mg的溶液，作为供试品溶液；(3)制备对照溶液：取供试品溶液适量，用有机溶剂稀释制成每1ml中含4‑氰基吡啶为5μg～15μg的溶液，作为对照溶液；(4)采用十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱；(5)设置液相色谱仪的流动相，即A相为改性缓冲盐，B相为有机相，设置液相色谱仪的梯度洗脱，方法见下表：时间(min)A相(％)B相(％)0901099010134060164060209010309010(6)设置液相色谱仪的流速为0.5～1.5mL/min，检测波长200～300nm，以及设置液相色谱仪色谱柱的柱温箱温度为10℃～40℃；(7)取步骤(1)(2)、(3)的样品溶液10μl注入经步骤(4)(5)、(6)设置的液相色谱仪，完成4‑氰基吡啶中3‑氰基吡啶和4‑甲基吡啶检测；(8)按自身对照法以峰面积计算供试品中3‑氰基吡啶,和4‑甲基吡啶的含量。