[发明专利]无抗生素表达外源基因的蓝藻工程菌系统及其制备和应用

摘要

本发明公布了一种无抗生素表达外源基因的蓝藻工程菌系统及其制备和应用。所述蓝藻工程菌表达系统包括：聚球藻PCC7002的△psbC突变体和整合载体，整合载体具有核心元件FlanKA—P₁—MCS—P₂—psbC—FlanKB，其中同源片段FlanKA和FlanKB能将P₁—MCS—P₂—psbC片段整合到聚球藻PCC7002内源质粒pAQ3的C0006和C0007的基因间区；外源基因插入到多克隆位点MCS中，由启动子P₁调控表达；P₂—psbC用来回复psbC基因缺失。本发明让蓝藻不用依赖抗生素培养压力来高效表达外源基因，不仅可大大降低利用蓝藻做生物反应器的成本，更可以减少因抗生素造成的环境污染和不安全性。

主权项

1.一种蓝藻工程菌表达系统，包括：聚球藻PCC7002的psbC基因缺失突变体△psbC和用于表达外源基因的整合载体，所述整合载体具有核心元件FlanKA—P₁—MCS—P₂—psbC—FlanKB，其中：FlanKA和FlanKB代表聚球藻PCC7002内源质粒pAQ3的两段同源片段，交换区域在C0006和C0007基因间区；MCS是用于插入外源基因的多克隆位点；P₁代表一种蓝细菌启动子，能够调控插入到MCS中的外源基因的表达；P₂代表用于启动psbC基因表达的启动子；psbC代表psbC基因序列。