[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶单克隆抗体及其制备方法在审
| 申请号： | 201610568754.6 | 申请日： | 2016-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN105949315A | 公开（公告）日： | 2016-09-21 |
| 发明（设计）人： | 余厚美;张振文;林立铭;王琴飞;徐媛 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 |
| 主分类号： | C07K16/40 | 分类号： | C07K16/40 |
| 代理公司： | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;陈欢 |
| 地址： | 57173*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | 本发明提供一种β‑葡萄糖苷酶单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤S1取抗原β‑葡萄糖苷酶注射免疫小鼠；S2间接ELISA法测免疫小鼠的血清效价；S3挑选血清效价为20000以上的小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞融合；S4融合后采用HAT培养液培养和间接ELISA检测筛选，获得阳性杂交瘤细胞；S5用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行克隆化直至出现阳性单克隆率为100％；S6采用小鼠体内诱生腹水法制备β‑葡萄糖苷酶单克隆抗体；S7纯化β‑葡萄糖苷酶单克隆抗体。通过本发明方法制备的β‑葡萄糖苷酶单克隆抗体具有高效价、高稳定性和高特异性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄 糖苷酶 单克隆抗体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种β‑葡萄糖苷酶单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：取抗原β‑葡萄糖苷酶注射免疫小鼠；S2：间接ELISA法测免疫小鼠的血清效价；S3：挑选血清效价为20000以上的小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞融合；S4：融合后采用HAT培养液培养和间接ELISA检测筛选，获得阳性杂交瘤细胞；S5：用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行克隆化直至出现阳性单克隆率为100％；S6：采用小鼠体内诱生腹水法制备β‑葡萄糖苷酶单克隆抗体；S7：纯化β‑葡萄糖苷酶单克隆抗体。
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