[发明专利]一种从茯苓中提取多糖的工艺

摘要

本发明公开了一种从茯苓中提取多糖的工艺，包括以下步骤：(1)选取茯苓原料超细粉碎得茯苓粉；(2)向上述茯苓粗粉中加水浸泡，再置于40000Hz超声波中处理20‑25min；(3)水浴后离心分离；(4)采用复合酶酶解分离获得滤液；(5)进行蛋白质沉淀、过滤，离心收集上清液；(6)将茯苓多糖提取液浓缩至原体积的10‑20％，得茯苓多糖浓缩液，喷雾干燥得到茯苓多糖；(7)超滤后进行柱层析得纯化茯苓多糖，冷冻干燥，得到茯苓多糖。本发明利用超声辅助提取的方法，工艺步骤简单，能显著提高茯苓多糖的浸出率，不仅提取的茯苓多糖立体结构不易被破坏、生物活性高，而且具有浸提时间缩短，提取条件温和的优点，反应产物无毒、无副作用等优点。

主权项

一种从茯苓中提取多糖的工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)选取质量好的茯苓原料置于60℃烘箱内干燥8‑10h，再进行超细粉碎得茯苓粉，过20‑40目筛，加入30‑60℃的石油醚至粉碎后的茯苓粉中浸润，静置10‑18min后按液固比5‑10ml/g加入50℃的无水乙醇，6‑10min后在1000r/min的条件下离心烘干，得茯苓粗粉；(2)向上述茯苓粗粉中加4‑6倍水浸泡煮沸30min，再置于40000Hz超声波中处理20‑25min，放置于70℃水浴中2h，并不时振荡；(3)将水浴后的混浊液在300‑500r/min条件下离心分离10min，收集离心后的上清液至于4℃条件下冷藏25‑30min；(4)采用复合酶在合适的条件下酶解上述上清液获得酶解液，而后酶解液灭酶活，采用回流法提取有效成分后固液分离获得滤液；(5)向上述酶解处理后的滤液中加入3倍体积的质量百分比浓度为6％的三氯乙酸溶液，在20℃下静置24h进行蛋白质沉淀、过滤，离心收集上清液，离心后的残渣按上述方法再提取至少3‑4次，合并上清液，得茯苓多糖提取液；(6)采用旋转蒸发仪在60‑80℃下将茯苓多糖提取液浓缩至原体积的10‑20％，得茯苓多糖浓缩液，再在4‑25℃乙醇溶液中沉降24h以上，离心10‑15min，弃上淸液并室温挥发干乙醇，喷雾干燥得到茯苓多糖；(7)用茯苓多糖质量5‑15倍的蒸馏水进行溶解，利用超滤膜将茯苓多糖提取液进行超滤，收集分子量10000道尔顿以上的组分，再进行葡聚糖凝胶SephadexG‑100于25℃以下进行柱层析得纯化茯苓多糖，收集茯苓多糖组分，冷冻干燥，得到茯苓多糖。