[发明专利]一种肾康宁胶囊指纹图谱的建立方法

摘要

一种肾康宁胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，涉及中药制剂质量控制方法。肾康宁胶囊用甲醇超声波提取，以丹参素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮为对照品，照高效液相色谱法建立指纹图谱，洗脱方法为梯度洗脱。本发明建立的肾康宁胶囊指纹图谱与相应的对照图谱进行相似度评价，其相似度大于0.9，能有效的检测到肾康宁胶囊处方中除山药、淡附片、茯苓外各药材的特征峰，有利于监控本产品的内在质量，从而保障其在治疗上的有效性。 1

主权项

1.一种肾康宁胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于肾康宁胶囊内容物以甲醇为溶剂超声提取，滤过，取滤液测试；以丹参素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮为对照品，用甲醇溶解，照高效液相色谱法建立指纹图谱；指纹图谱中12个特征共有峰与峰3的相对保留时间如下：峰1 ：0.52；峰2 ：0.76 ；峰3 ：1.00；峰4 1.23；峰5 ：1.55；峰6 ：1.57；峰7 ：2.23；峰8 ：2.81；峰9 ：3.30 ；峰10 ：3.64；峰11 ：3.75；峰12 ：3.81；所述峰3为丹参素；高效液相色谱法的色谱条件为：C18色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为1%冰醋酸水溶液；检测波长260～300nm；柱温为15～35℃ ；流速0.5～1.5ml/min；洗脱方法为梯度洗脱，其中梯度洗脱的时间程序及其流动相的体积变化按下表设置进行：

时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0～1529815～302→1098→9030～6510→3090→7065～703070

                                                                       。

2.根据权利要求1所述的一种肾康宁胶囊HPLC 指纹图谱的建立方法，其特征在于：

（a）供试品溶液的制备：取肾康宁胶囊内容物0.5～2g，充分研细后加入甲醇25～100ml，超声处理20～40分钟，取出放冷，滤过，滤液浓缩至5～20ml，用孔径为0.45μm的滤头滤过为供试品溶液；

（b）对照品溶液的配制：精密称取丹参素对照品适量、毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品适量、毛蕊异黄酮对照品适量，加甲醇分别制成每1ml各含0.2mg的对照品溶液；

（c）色谱条件：C18色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为1%冰醋酸水溶液，梯度洗脱，流速0.5～1.5ml/min，柱温25～35℃，检测波长：280nm；

（d）测定：精密吸取供试品溶液、对照品溶液5～15μl，分别注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到肾康宁胶囊的指纹图谱。

3.根据权利要求2所述的一种肾康宁胶囊HPLC 指纹图谱的建立方法，其特征在于：

（a）供试品溶液的制备：精密称取充分研细后的肾康宁胶囊内容物1g，加入甲醇50ml，超声处理30分钟，取出放冷，滤过，浓缩至5ml，取续滤液为供试品溶液；

（b）对照品溶液的配制：精密称取丹参素对照品2mg，加甲醇10ml充分溶解，作为丹参素对照品溶液；精密称取毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品2mg，加甲醇10ml充分溶解，作为毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品溶液；精密称取毛蕊异黄酮对照品2mg，加甲醇10ml充分溶解，作为毛蕊异黄酮对照品溶液；

（c）色谱条件：C18色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为1%冰醋酸水溶液，梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长：280nm；

（d）测定：精密吸取供试品溶液、对照品溶液10μl，分别注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到肾康宁胶囊的指纹图谱。