[发明专利]一种稳定表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的重组细胞系、疫苗和应用在审
| 申请号： | 201610573424.6 | 申请日： | 2016-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN107619819A | 公开（公告）日： | 2018-01-23 |
| 发明（设计）人： | 李安迪;高永新;颜仁和;王升尧;刘军;李红卫 | 申请（专利权）人： | 广州伯尼兹生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/86;A61K39/215;A61P31/14 |
| 代理公司： | 广州市深研专利事务所44229 | 代理人： | 姜若天 |
| 地址： | 510515 广东省广州市广州高新技术产业*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种稳定表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的重组细胞系、疫苗和应用，该重组细胞系是采用慢病毒载体携带目的基因构建重组质粒后转染HEK‑293T细胞，产生的高滴度病毒颗粒再感染HEK‑293T细胞从而构建得到的，表达稳定，在多次传代后仍保持很好的蛋白表达水平。本发明的稳定表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的重组细胞系，具有容易培养、增殖快速、可无限扩大、性质稳定和蛋白表达量高的特点，其表达蛋白与佐剂制备成疫苗后免疫猪能诱导动物机体产生高效价猪流行性腹泻病毒中和抗体，仔猪可抵抗猪流行性腹泻病毒强毒攻击。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 稳定 表达 流行性 腹泻 病毒 s1 蛋白 重组 细胞系 疫苗 应用 | ||
【主权项】：
一种稳定表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的重组细胞系，其特征在于该重组细胞系是由如下方法制备而得：步骤1：构建慢病毒重组载体，该慢病毒重组载体包括编码猪流行性腹泻病毒S1蛋白的基因序列，所述编码猪流行性腹泻病毒S1蛋白的基因序列如SEQ ID NO：1所示；步骤2：将所述慢病毒重组载体与慢病毒包装辅助质粒共转染人胚胎肾细胞HEK‑293T，进行病毒包装和生产，收集病毒液；步骤3：用上述病毒液感染人胚胎肾细胞HEK‑293T后培养，将培养的细胞进行稀释克隆，收集克隆细胞培养上清液与细胞，检测并比较猪流行性腹泻病毒S1蛋白的表达量，获得稳定表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的重组细胞系。
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