[发明专利]检测脂多糖的比色传感器、其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种检测脂多糖的比色传感器、其制备方法和应用，传感器通过紫外‑可见光谱技术进行检测，其特征在于利用了氨基苯硼酸修饰的磁纳米颗粒对脂多糖的识别及其类似于过氧化物酶的催化氧化活性和脂多糖类脂质双层对离子运输的阻碍作用。本发明利用了3‑氨基苯硼酸与脂多糖的高特异性结合及脂多糖类脂质双层对离子运输的阻碍作用，保证了检测的高度特异性，借助磁纳米颗粒类似于过氧化物酶的催化氧化活性，提高了检测的灵敏性。通过紫外‑可见光谱技术捕捉磁纳米催化H₂O₂氧化ABTS产生的颜色变化，实现了脂多糖的分析检测。本发明方法简单、快速、无需信号标记；灵敏度高，可以在0.00001μg/mL到180μg/mL范围内线性检测脂多糖；特异性强，可以有效地区分脂多糖与其他对照物质。

主权项

1.一种检测脂多糖的比色传感器，其特征在于：主要由试剂盒、固液分离装置、紫外‑可见光谱分析装置、分析系统和控制系统组成，所述控制系统控制试剂盒中的试剂的供应和检测数据的输入和输出；将3‑氨基苯硼酸修饰到磁纳米颗粒上，利用固液分离装置，得到磁纳米颗粒表面覆盖硼酸识别基团的MNPs磁纳米颗粒，并制备覆盖硼酸识别基团的MNPs磁纳米颗粒溶液，作为第一识别试剂，存储设置于第一试剂盒中；在酸性条件下，按照2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐和过氧化氢的设定混合比例，将2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐与过氧化氢进行混合，制成ABTS‑H2O2酸性溶液体系，作为第二识别试剂，存储设置于第二试剂盒中；按照设定混合比例，以第一识别试剂中的MNPs磁纳米颗粒作为催化剂，以过氧化氢作为氧化剂，将所述第一识别试剂和所述第二识别试剂作为反应物进行混合，制成MNPs‑ABTS‑H2O2反应物体系，反应后形成的产物体系溶液，作为参照试剂，利用紫外‑可见光谱分析装置，检测参照试剂的光谱，并以所述参照试剂作为具有特征光谱的参考元件；按照设定混合比例另外取用所述第一识别试剂和所述第二识别试剂，首先将所述第一识别试剂首先与待测的脂多糖样品溶液混合，得到脂多糖类脂质双层覆盖的磁纳米颗粒溶液，作为初步的目标检测样品的MNPs‑LPS体系溶液，然后将MNPs‑LPS体系溶液和所述第二识别试剂混合，经过至少5min后形成优化的目标检测样品的MNPs‑LPS‑ABTS‑H2O2试剂体系，使MNPs‑LPS‑ABTS‑H2O2试剂体系作为最终的目标检测样品试剂，利用紫外‑可见光谱分析装置，检测MNPs‑LPS‑ABTS‑H2O2试剂体系的光谱，通过分析系统与所述参照试剂的特征光谱进行对比，并通过光谱对比结果来确定所检测的脂多糖的含量水平。