[发明专利]银花泌炎灵片的检测方法

摘要

本发明涉及一种银花泌炎灵片的检测方法，属于中药现代化领域。包括半枝莲、川木通的鉴别方法，金银花和石苇的含量测定，半枝莲、金银花的含量测定。本发明能更全面的检测药物的成分，了解其含量和稳定性，也有助于说明药物的药用物质基础。

主权项

一种银花泌炎灵片的检测方法，其特征在于，包括如下鉴别方法和含量测定方法：（一）鉴别方法：（1）取本品，置显微镜下观察：花粉粒黄色，类圆形或圆三角形，直径60～92μm，外壁表面有细密短刺及圆形细颗粒状雕纹，具3孔沟，金银花；（2） 取本品 8 片，除去包衣，研细，加丙酮 30ml，回流提取 1 小时，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加无水乙醇 2ml 使溶解，作为供试品溶液，另取半枝莲对照药材2g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，《中国药典》2015年版，通则0502，吸取上述两种溶液各4µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷：二氯甲烷：乙酸乙酯=7：2.5：4为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（3）取本品8片，除去包衣，研细，加水30ml，超声处理20分钟，离心，上清液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取川木通对照药材2g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，《中国药典》2015年版，通则0502，吸取上述两种溶液各4µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷：丙酮=4：1，为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（二）、含量测定（1）金银花、石苇：照高效液相色谱法测定，《中国药典》2015年版，通则 0512，色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：水：冰醋酸=10：100：2为流动相；检测波长为 323nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于 1500，对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加水制成每 1ml 含80µg 的溶液，摇匀，即得，10℃以下避光保存；供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加三氯甲烷 50ml，超声处理30 分钟，功率250 W，频率5 kHz，避光，放冷，滤过，将药渣连同滤纸一并放回锥形瓶中，精密加乙醇 50ml，称定重量，加热回流 2 小时，避强光，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5µl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每片含金银花、石苇以绿原酸C₁₆H₁₈O₉ 计，不得少于3.60mg；（2）半枝莲 照高效液相色谱法测定，《中国药典》2015年版，通则0512，色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇：0.4%磷酸溶液=15:85为流动相；检测波长为335nm，理论板数按野黄芩苷峰计算应不低于5000；对照品溶液的制备 取野黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含12µg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇25ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每片含半枝莲以野黄芩苷C₂₁H₁₈O₁₂计，不得少于0.25mg；（3）金银花 照高效液相色谱法测定，《中国药典》2015 年版，通则0512，色谱条件与系统适用性试验 以苯基硅烷键合硅胶为填充剂Themo Dim(mm)，4.6mm*250mm，5µm；以乙腈为流动相A，以 0.5％冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为350nm，理论板数按木犀草苷峰计算应不低于17000，流动相A 10~13%，流动相B87~90%，0~10分钟，流动相A13%，流动相B87%，10~40分钟；对照品溶液的制备，取木犀草苷对照品适量，精密称定，加70％乙醇制成每1ml含40µg的溶液，即得；供试品溶液的制备，取重量差异项下的本品，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇 50ml，称定重量，超声处理1小时，功率 250W，频率35kHz，放冷，再称定重量，用 70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液 10µ1，与供试品溶液 10~20µ1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每片含金银花以木犀草苷C₂₁H₂₀O₁₁计，不得少于0.15mg。