[发明专利]一种高转糖苷活性低水解活性的β-半乳糖苷酶双点突变体及其制备方法有效
| 申请号： | 201610579268.4 | 申请日： | 2016-07-21 |
| 公开（公告）号： | CN105950588B | 公开（公告）日： | 2019-04-05 |
| 发明（设计）人： | 董艺凝;陈卫;陈海琴;张灏 | 申请（专利权）人： | 滁州学院 |
| 主分类号： | C12N9/38 | 分类号： | C12N9/38;C12N15/70;C12P19/14 |
| 代理公司： | 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙) 11305 | 代理人： | 向华 |
| 地址： | 239000 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明提供一种兼具高转糖苷活性、低水解活性的β‑半乳糖苷酶双点突变体，该突变体是对β‑半乳糖苷酶BgaB的E303和F341两个位点进行定点突变，其中，E303点位由原谷氨酸Glu突变为半胱氨酸Cys，F341点位由原苯丙氨酸Phe突变为丝氨酸Ser，然后将双点突变体经KI氧化处理所得。本发明还涉及所述双点突变体的构建方法及应用。本发明以嗜热脂肪芽孢杆菌来源β‑半乳糖苷酶BgaB为功能改造对象，所得的双点突变体催化底物乳糖能够获得大于二糖的低聚糖混合物，合成量达到9.5％，且降低了其对合成产物的降解能力。此外，本发明的突变体适用于中性、高温度条件下催化乳糖水解与低聚半乳糖合成。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 糖苷 活性 水解 半乳糖 苷酶双点 突变体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种兼具高转糖苷活性、低水解活性的β‑半乳糖苷酶双点突变体，其特征在于该突变体是对β‑半乳糖苷酶BgaB的E303和F341两个位点进行定点突变，其中，E303点位由原谷氨酸Glu突变为半胱氨酸Cys，F341点位由原苯丙氨酸Phe突变为丝氨酸Ser，然后将双点突变体经KI氧化处理所得。
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