[发明专利]新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法

摘要

本发明涉及新会大红柑育苗繁殖技术领域，具体涉及一种新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法。所述微嫁接方法主要包括如下步骤：取目标植株的1‑2mm茎尖，采用改良MT培养基预培养，投入液氮脱毒，恢复接种到继代培养基中培养；砧木种子消毒，灭菌，萌发；将新会大红柑腋芽发育好的丛生芽嫁接到砧木上，再进行试管内液体培育苗。本培养法采用改良MT培养基预培养，改良之后继代增值系数大于4，基本没有出现玻璃化现象，变异也大大减少；本培养法使得植物根系更加发达，抗恶劣环境性强，更容易适应南方潮湿多雨的气候环境，成活率也大大提高。

主权项

新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，其特征在于，主要包括如下步骤：步骤一、脱毒新会大红柑丛生芽的获得：将消毒、灭菌处理的新会大红柑母枝在超净工作台上切取茎尖1‑2mm，转移到改良MT培养基中预培养，在4℃黑暗条件下进行预培养3‑5天后，将茎尖组织转移到保护培养基中冰冻适应1h，后将其转移到冷冻管并迅速投入液氮中，使茎尖组织快速降温到‑196℃并持续1h，然后再快速转移到45℃水中解冻恢复，然后接种到继代培养基中，25℃暗培养一周后进行常规光照培养，获得脱毒新会大红柑丛生芽；步骤二、砧木选择：将柠檬或香橙种子在超净工作台经酒精、升汞消毒后接种到1/2MS培养基，待种子萌发后挑选出粗壮、生长状态好的幼苗，待幼苗生长到第二片真叶形成后，作为接种砧木待微嫁接；步骤三、微嫁接：在超净工作台上放置接种槽，然后在接种槽内放置灭菌的糯米纸并将糯米纸固定在接种槽内，将步骤二的接种砧木在距离根部4‑5cm处截断，放置在糯米纸上；再将步骤一继代增殖得到的脱毒新会大红柑丛生芽的形成层对齐砧木并插入砧木切口内，压实砧木和脱毒新会大红柑丛生芽后，将糯米纸对折固定，获得微嫁接苗；步骤四、培养移栽：向试管内注入1/4体积的液体培养液，并环形放入2cm滤纸作为固定，经灭菌后，将步骤三获得的微嫁接苗，转移到液体培养液中，置于温度25℃、光照强度为2500‑3000lux的恒温环境下培养30天，待砧木根部开始生长，丛生芽叶片正常舒展生长后，置于自然光中炼苗30天后，即可洗苗移栽。