[发明专利]根瘤农杆菌介导的特异腐质霉的遗传转化方法及其表达载体有效
申请号: | 201610582793.1 | 申请日: | 2016-07-21 |
公开(公告)号: | CN106350461B | 公开(公告)日: | 2019-08-23 |
发明(设计)人: | 徐欣欣;张伟;刘波;张宇宏;李金阳 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12N1/15 | 分类号: | C12N1/15;C12N15/80;C12N15/65;C12N9/24;C12R1/645 |
代理公司: | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人: | 余光军 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了根瘤农杆菌介导的特异腐质霉遗传转化方法及其表达载体,属于特异腐质霉的遗传转化领域。本发明特异腐质霉遗传转化方法,包括:(1)构建目的基因的表达质粒;(2)将表达质粒转化根瘤农杆菌感受态细胞,得到转入目的质粒的根瘤农杆菌,将其扩大培养得到根瘤农杆菌菌液;(3)将特异腐质霉涂布在平板上进行预萌发;(5)将根瘤农杆菌菌液与已萌发有菌丝的特异腐质霉进行共培养,再通过选择性培养,获得转化子。本发明利用上述方法构建突变库并获得一株纤维素酶高产突变株Y1‑T4。本发明转化方法操作简单,稳定,使得在特异腐质霉中进行同源和异源基因表达成为可能,为建立特异腐质霉的高效表达体系提供了必要的技术保障。 | ||
搜索关键词: | 根瘤 杆菌 特异 腐质霉 遗传 转化 方法 及其 表达 载体 | ||
【主权项】:
1.一株特异腐质霉(Humicola insolens)突变株Y1‑T4,其特征在于:其微生物保藏编号为:CGMCC No.12454。
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