[发明专利]凝血蛋白缀合物

摘要

本发明涉及使水溶性聚合物缀合于凝血蛋白的氧化的碳水化合物部分的材料和方法，所述方法包括使所述氧化的碳水化合物部分与活化的水溶性聚合物在允许缀合的条件下接触。更具体地，本发明涉及上述材料和方法，其中所述水溶性聚合物含有活性氨氧基，且其中肟键合在所述氧化的碳水化合物部分与所述水溶性聚合物上的活性氨氧基之间形成。在本发明的一个实施方案中，所述缀合在亲核性催化剂苯胺存在下进行。另外，所产生的肟键合可通过用NaCNBH₃还原形成烷氧基胺键合来稳定。

主权项

一种使水溶性聚合物缀合于凝血蛋白的氧化的碳水化合物部分的方法，所述方法包括使所述氧化的碳水化合物部分与活化的水溶性聚合物在允许缀合的条件下接触；所述凝血蛋白选自由以下所组成的组：因子IX(FIX)、因子VIII(FVIII)、因子VIIa(FVIIa)、冯威利布兰德因子(VWF)、因子FV(FV)、因子X(FX)、因子XI(FXI)、因子XII(FXII)、凝血酶(FII)、蛋白质C、蛋白质S、tPA、PAI‑1、组织因子(TF)及ADAMTS 13蛋白酶或其生物活性片段、衍生物或变异体；所述水溶性聚合物含有活性氨氧基且选自由以下所组成的组：聚乙二醇(PEG)、分支PEG、聚唾液酸(PSA)、碳水化合物、多糖、普鲁兰、壳聚糖、透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、淀粉、葡聚糖、羧甲基‑葡聚糖、聚环氧烷(PAO)、聚亚烷基二醇(PAG)、聚丙二醇(PPG)、聚噁唑啉、聚丙烯酰基吗啉、聚乙烯醇(PVA)、聚羧酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚磷腈、聚噁唑啉、聚乙烯‑共‑顺丁烯二酸酐、聚苯乙烯‑共‑顺丁烯二酸酐、聚(1‑羟基甲基亚乙基‑羟基甲基缩甲醛)(PHF)、磷酸2‑甲基丙烯酰氧基‑2’‑乙基三甲基铵(MPC)；且所述碳水化合物部分通过用包含氧化剂的缓冲液孵育而氧化，所述氧化剂选自由以下所组成的组：过碘酸钠(NaIO₄)、四乙酸铅(Pb(OAc)₄)及过钌酸钾(KRuO₄)；其中肟键合在所述氧化的碳水化合物部分与所述水溶性聚合物上的活性氨氧基之间形成。