[发明专利]一种利用纳米微球时间分辨荧光探针检测四环素的方法

摘要

本发明公开了一种利用纳米微球时间分辨荧光探针检测四环素的方法，其包括以下的步骤制备羧基化聚苯乙烯纳米微球、制备纳米荧光微球；其中，稀土元素离子、β‑二酮体类螯合物和荧光增强协同剂的摩尔比为1∶3∶3～1∶3∶4、制备纳米微球时间分辨荧光‑四环素探针、制备层析试纸条、利用上述探针和层析试纸条检测四环素。该检测方法检测灵敏度高，检测范围广，稳定可靠，仅需5分钟就能获得测定结果，拥有良好的商业化应用前景。

主权项

一种利用纳米微球时间分辨荧光探针检测四环素的方法，其特征在于，其包括以下的步骤：(1)制备羧基化聚苯乙烯纳米微球；(2)利用步骤(1)制备的羧基化聚苯乙烯纳米微球，制备纳米荧光微球；所述纳米荧光微球中，稀土元素离子、β‑二酮体类螯合物和荧光增强协同剂的摩尔比为1∶3∶3～1∶3∶4；(3)利用步骤(2)制备的纳米荧光微球和四环素单克隆抗体，制备纳米微球时间分辨荧光‑四环素探针；利用步骤(2)制备的纳米荧光微球和兔IgG单克隆抗体制备纳米微球时间分辨荧光‑兔IgG探针；(4)冻干步骤(3)制备的纳米微球时间分辨荧光‑四环素探针和纳米微球时间分辨荧光‑兔IgG探针，得到冻干的纳米荧光微球标记的四环素单克隆抗体和和冻干的纳米荧光微球标记的兔IgG单克隆抗体；(5)利用四环素制备检测线T线，利用羊抗兔二抗制备质控线C线，喷涂、组装获得层析试纸条；(6)将步骤(4)制备的冻干的纳米荧光微球标记的四环素单克隆抗体和和冻干的纳米荧光微球标记的兔IgG单克隆抗体加入到酶标板的孔中；(7)取待测样品加入步骤(6)的酶标板的孔中；(8)向步骤(7)的酶标板的孔中插入步骤(5)制备的层析试纸条，样品垫一端浸入到所述孔中的液体0.5cm，浸入5分钟后插入荧光读数仪中读数，得到检测结果。