[发明专利]一种利用酶结合微生物转化生产黄姜皂素的方法

摘要

一种利用酶结合微生物转化生产黄姜皂素的方法，先利用超微粉碎技术将黄姜粉碎成细颗粒，再通过中空纤维膜截留得到皂苷溶液，利用单酶水解或混合酶水解，初步将50‑70％的皂苷转化为皂素；接下来加入黄芪提取液、低聚异麦芽糖和金银花药液等可以促进益生菌生长的物质，接入一定量植物乳杆菌，利用生物转化对酶解未完全转化的皂苷进行二次转化，最终将70‑85％的皂苷转化为皂素；本过程采用酶结合微生物转化的方法，通过二次转化，提高了黄姜的利用率，降低了原材料成本，同时避免使用酸水解，较少了酸带来的污染，降低了废水中BOD和COD含量，属于环境友好型生产技术。

主权项

一种利用酶结合微生物转化生产黄姜皂素的方法，其特征在于：1)采用超微粉碎机将黄姜磨成粉末，然后将黄姜粉末加入足量的水中，静置，待产生沉淀分层，即上清液，悬浊液和沉淀共三层；倒出上清液，将悬浊液和沉淀进行振荡混匀，得到悬浮液；2)将悬浮液离心得到悬浮液清液和沉淀层，利用中空纤维超滤膜对悬浮液清液进行过滤，得到黄姜皂苷保留液；将保留液与悬浮液沉淀混合，并调整得到固形物含量为5‑7％的混合液，按每100ml混合液中加入0.5‑2.0g的固定化果胶酶、固定化纤维素酶、固定化半纤维素酶中的一种或一种以上的混合物，调整pH为4‑5后，于40‑50℃下进行初步降解6‑7h，向初步降解后的混合液中分别按照每100ml加入0.01‑0.05mg黄芪提取液、1‑3g金银花药液、1‑3g低聚异麦芽糖、0.5‑1g(NH₄)₂SO4、0.005‑0.010ml吐温80及0.1‑0.3g醋酸钠得到发酵培养基，将培养基pH调整至6.0‑7.0，灭菌冷却后按发酵培养基3％‑9％的接种量接入植物乳杆菌，在33‑40℃下发酵培养12‑36h进行生物转化，将黄姜皂苷转化为黄姜皂素得发酵液；3)将发酵结束后的发酵液调pH至6.0‑7.0，离心得到上清液和沉淀，倒掉上清液，将沉淀烘干至固形物，再将固形物置于索氏抽提仪中，以60‑90沸程石油醚为萃取剂进行索氏提取1‑3h，再通过浓缩结晶得到黄姜皂素。