[发明专利]苦丁茶提取物的制备及抗阿尔兹海默症用途

摘要

本发明提供一种苦丁茶提取物的制备方法，通过将中药苦丁茶粉碎和浸提，分离和纯化，获得苦丁茶提取物为活性组分(A)，(b)‑(f)，(B)‑(E)，和活性化合物(1)‑(5)。苦丁茶活性组分(A)，(b)‑(f)，(B)‑(E)，活性化合物(1)‑(5)具有显著的拟神经生长因子的活性，可以制备预防阿尔兹海默症等神经退行性疾病的药物和保健食品。本发明中的中药苦丁茶来源广泛，取材便利，廉价易得，所以将苦丁茶开发为预防和治疗阿尔兹海默症等神经退行性疾病的新药和保健食品具有重要意义。

主权项

1.苦丁茶提取物在制备预防或治疗阿尔兹海默症神经退行性疾病的药物中的应用，其特征在于，所述的苦丁茶提取物为活性组分（A），（b）‑（f），（B）‑（E），和化合物（1）‑（5），所述苦丁茶提取物，通过以下制备步骤实现：（1）粉碎和浸提：取中药苦丁茶粉碎后，用甲醇溶液室温下震荡浸提3次，每次24小时，所得滤液经浓缩干燥后，用水和乙酸乙酯交替萃取分离，得到酯层活性组分（A）；（2）分离和纯化：将活性组分（A）先经一次硅胶开口柱分离，以下溶剂系统均按体积比，经正己烷:乙酸乙酯洗脱，洗脱梯度：100:0，70:30，50:50，0:100，最后用甲醇冲洗，合并正己烷:乙酸乙酯70:30的洗脱流分，得到活性组分（b）；合并甲醇的洗脱流分，得到活性组（B）；活性组分（b）经硅胶开口柱分离，正己烷：氯仿3:7洗脱，得活性组分（c），继续经硅胶开口柱分离，合并正己烷：氯仿5:5洗脱流分得活性组分（d），活性组分（d）经正己烷：氯仿7:3洗脱得活性组分（e）；活性组分（e）用HPLC纯化，色谱条件为：色谱柱ODS‑HG‑5，流速3 ml/min，检测波长210 nm，流动相为99%乙腈水溶液等度洗脱，在t_R=38 min得到化合物（1）、t_R=57 min得化合物（2），得到活性组分（f）；活性组分（f）继续用HPLC纯化，色谱条件为：色谱柱ODS‑HG‑5，流速3 ml/min，检测波长210 nm，流动相为97%甲醇水溶液等度洗脱，在t_R=37 min得到化合物（3）、在t_R=35 min得到化合物（4）；将活性组分（B）进一步用ODS开口柱分离，溶剂系统按体积比为甲醇:水 = 5:5, 7:3, 8:2, 9:1, 10:0，合并甲醇:水为8:2至 9:1的洗脱流分，得到活性组分（C）；活性组分（C）再次用硅胶开口柱分离，溶剂系统按体积比为氯仿:乙酸乙酯 = 95:5, 90:10, 80:20, 70:30，60:40，50:50，40:60，30:70，20:80，90:10, 100:0，合并甲醇:水为10:90至 0:100的洗脱流分，得到活性组分（D）；活性组分（D）用HPLC纯化，色谱条件为：色谱柱ODS‑HG‑5，流速3 ml/min，检测波长210 nm，流动相为45%乙腈水溶液等度洗脱30 分钟，得到活性组分（E），继续用HPLC纯化，色谱条件为：色谱柱PAKC₁₈，流速3 ml/min，检测波长210 nm，流动相为63%甲醇水溶液等度洗脱50 分钟，得到化合物（5）。