[发明专利]一种与金属离子具有更强结合力的蛋白纯化标签及其应用有效
申请号: | 201610601945.8 | 申请日: | 2016-07-27 |
公开(公告)号: | CN106188234B | 公开(公告)日: | 2019-05-17 |
发明(设计)人: | 葛保胜;李皓然;陈瑶;陈泽文;黄方 | 申请(专利权)人: | 中国石油大学(华东) |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K5/097;C07K5/117;C07K1/22 |
代理公司: | 北京冠和权律师事务所 11399 | 代理人: | 李建华 |
地址: | 266580 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种能与金属离子具有高结合力的亲和色谱蛋白纯化标签m‑HDn‑Tag,该m‑HDn‑Tag蛋白纯化标签为将传统含有m个组氨酸纯化标签(m‑His‑Tag)中某个位点(n)的氨基酸突变成天冬氨酸(D)后得到的一种蛋白纯化标签(表示为m‑HDn‑Tag)。与目前常用的多聚组氨酸标签(His‑Tag)相比,在相同氨基酸个数的情况下,m‑HDn‑Tag具有更强的金属离子螯合能力,使目的蛋白能更好的与金属螯合亲和树脂结合,提高目的蛋白的纯化效率和纯度,同时m‑HDn‑Tag整体带电性和分子量较相同氨基酸个数的m‑His‑Tag均有所降低,使得该标签对目标蛋白质折叠及功能的影响更小。 | ||
搜索关键词: | 一种 金属 离子 具有 结合 蛋白 纯化 标签 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种能与金属离子具有更强结合力的蛋白亲和纯化标签,其特征在于:在多聚组氨酸(H)蛋白纯化标签的基础上,将标签内部某一位点的组氨酸(H)突变为天冬氨酸(D);所述蛋白亲和纯化标签的结构为m‑HDn‑Tag,其中m表示氨基酸总数,m为6,n表示为自N末端起,第n个氨基酸突变为D,n的数值为3或5。
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