[发明专利]利用转座子酶进行体外核酸单向扩增的方法、组合物和试剂盒有效
申请号: | 201610608744.0 | 申请日: | 2016-07-28 |
公开(公告)号: | CN106222164B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 田埂 | 申请(专利权)人: | 元码基因科技(北京)股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京科石知识产权代理有限公司 11595 | 代理人: | 高元吉 |
地址: | 100102 北京市朝*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种利用转座子酶进行体外核酸单向扩增的方法、组合物和试剂盒。本发明能够通过结合转座子酶和单向特异性扩增及高通量测序的方法,完成了目标区域扩增的过程,并且很好的还原了原始的DNA突变频率。可实现对特定DNA序列的检测,达到对肿瘤细胞突变或者遗传病的基因进行检测的目的。本发明克服了传统的方法需要杂交或者在大量PCR扩增中存在的偏向性的问题,同时保留了突变频率,并克服了测序错误和扩增错误带来的样本的假阳性问题。 | ||
搜索关键词: | 利用 座子 进行 体外 核酸 单向 扩增 方法 组合 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种利用转座子酶进行体外核酸单向扩增的方法,其包括以下步骤:提供转座子酶和核酸的步骤;提供第一寡核苷酸序列和第二寡核苷酸序列的步骤;使所述转座子酶与所述核酸进行反应,从而改变所述核酸的序列的步骤;利用所述第一寡核苷酸序列和所述第二寡核苷酸序列进行核酸扩增的步骤;其中所述转座子酶包含至少一种转座子酶结合序列,且所述第一寡核苷酸序列的至少一部分与所述核酸中的特定区域结合,所述第二寡核苷酸序列包含转座子酶结合序列中的至少一部分。
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