[发明专利]一种免疫传感器对黄曲霉毒素的检测方法

摘要

本发明公开了一种免疫传感器对黄曲霉毒素的检测方法，黄曲霉毒素(aflatoxin，AFT)是一种具有较强的致癌性、致畸性和强烈毒性的真菌毒素，对黄曲霉毒素进行准确而快速的分析是降低和避免黄曲霉毒素危害的最有效手段之一。采用紫外光谱、透射电镜对制备的金/聚苯胺/石墨烯(Au/PANI/GN)复合纳米材料进行表征，并且将该材料用于构建电化学免疫传感器，采用循环伏安法，电化学交流阻抗法，方波伏安法对其进行表征，制备的电化学免疫传感器对黄曲霉毒素B1进行检测。实验结果表明：构建的电化学免疫传感器，对黄曲霉毒素的检测具有良好的电化学活性，黄曲霉毒素的浓度与峰电流呈现良好的线性关系，其线性方程为y＝‑0.177x+4.28。

主权项

1.一种免疫传感器对黄曲霉毒素的检测方法，其特征在于，该免疫传感器对黄曲霉毒素的检测方法包括：将制备的不同类型的纳米材料修饰在金电极表面用于构建不同类型的电化学传感器，采用交流阻抗法、循环伏安法检测传感器的电化学性能；黄曲霉毒素免疫传感器的构建，先在金电极表面滴涂金/聚苯胺/石墨烯复合纳米材料，晾干成膜后孵育anti‑黄曲霉毒素，然后用牛血清蛋白溶液封闭非特异性活性位点，接着孵育一系列不同浓度的黄曲霉毒素抗原用于和抗体特异性识别，采用方波循环伏安法对黄曲霉毒素抗体的浓度和孵育时间进行条件优化、对缓冲溶液的pH和黄曲霉毒素抗原免疫反应时间进行优化，筛选最佳条件；在最佳条件下采用交流阻抗法和方波循环伏安法，对不同浓度的黄曲霉毒素进行定量分析测定；滴涂金/聚苯胺/石墨烯制备方法包括：不同金负载率的滴涂金/聚苯胺/石墨烯复合纳米材料的制备：准确量取10 mg 聚苯胺/石墨烯于烧杯中，超声分散，分别加入10 mg、40 mg HAuCl4.2H2O和14.705 mg柠檬酸三钠，加水至20 mL，超声分散，逐滴加入冰浴的0.6 mL 0.1 mol/L NaBH4搅拌12 h反应完全后，二次蒸馏水离心清洗，即可滴涂金/聚苯胺/石墨烯复合纳米材料，备用；所述的滴涂金/聚苯胺/石墨烯复合纳米材料的制备中还原剂有硼氢化钠、抗坏血酸；所述的滴涂金/聚苯胺/石墨烯复合纳米材料的制备中，反应原料中聚苯胺/石墨烯与氯金酸的质量比分别为1:1和1:4。