[发明专利]一种乳腺癌联合化疗用纳米复合石墨烯水凝胶体系及其制备方法

摘要

本发明公开了一种具有pH/温度双重响应性，可同时运载乳腺癌联合化疗药物紫杉醇和表阿霉素的纳米复合石墨烯水凝胶载药体系的制备方法，包括如下步骤：(1)制备负载疏水性药物紫杉醇的石墨烯PTX@GN；(2)将PTX@GN作为添加剂，选用温敏性N‑异丙基丙烯酰胺NIPAM单体为第一网络，通过自由基聚合反应制备得到单网络水凝胶；然后选用pH响应性的丙烯酸AA单体作为第二网络，通过紫外辐照的方法合成pH/温度双重响应性的纳米复合石墨烯双网络水凝胶；(3)再负载亲水性药物表阿霉素EPI，得到负载双重药物PTX和EPI的纳米复合石墨烯水凝胶双载药体系EPI@PTX@GDL；(4)将所制备的载药体系用MTT法检测细胞毒性，并用荧光显微镜进行观察活细胞形态。本发明还公开了所制备的复合载药体系在乳腺癌治疗中的应用。

主权项

1.一种纳米复合石墨烯水凝胶体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：采用两亲性聚合物PF127修饰，并用水合肼将氧化石墨烯还原为石墨烯，进而负载疏水性药物PTX，得到负载疏水性药物紫杉醇的石墨烯PTX@GN；步骤2：将PTX@GN作为添加剂，再选用温敏性的N‑异丙基丙烯酰胺NIPAM单体为第一网络，通过自由基聚合反应制备得到单网络水凝胶GSL；再选用pH响应性的丙烯酸AA单体作为第二网络，通过紫外辐照的方法合成pH/温度双重响应性的纳米复合石墨烯双网络水凝胶GDL；步骤3：将纳米复合石墨烯水凝胶再负载亲水性药物表阿霉素EPI，得到负载双重药物PTX和EPI的纳米复合石墨烯水凝胶双载药体系EPI@PTX@GDL；所述的步骤1，包括如下具体步骤：将300～400mgPF127加入到10～20mL，0.5～1.5mg/mL石墨烯GO水溶液中，室温搅拌下加入300～500μL水合肼，于30～50℃下超声搅拌反应12～36h，将氧化石墨烯GO还原为石墨烯GN；反应结束后将混合液进行压滤即得PF127修饰的石墨烯；将0.008～0.012gPF127修饰的GN加入到20～40mL，0.8～1.2mg/mLPTX的PBS缓冲液中，25℃下避光搅拌14～18h，离心并洗涤，冷冻干燥得到载紫杉醇的石墨烯PTX@GN；所述的步骤2包括如下具体步骤：将0.8～1.2gNIPAM、0.01～0.03gPTX@GN、0.01～0.03gN,N’‑亚甲基双丙烯酰胺BIS溶于8～12mL水中，在冰水浴中持续搅拌1～3h至单体完全溶解；然后加入10～30μL促进剂N,N,N’,N’‑四甲基乙二胺TEMED，继续搅拌5～15min；最后，称取0.01～0.03g过硫酸胺APS加入溶液中，搅拌至溶解，将溶液移放至18～22℃的水浴中静置22～26h，得到第一网络水凝胶GSL；将制备得到的第一网络水凝胶用去离子水洗涤，置于0.04～0.06g2‑氧代戊二酸2‑OG、0.01～0.03gBIS、1～3mol/L的AA溶液中，静置44～52h后紫外辐照8～12h，灯与凝胶间距18～22cm，得双重响应性双网络纳米复合石墨烯水凝胶GDL；所述的步骤3包括如下具体步骤：将7～8mgEPI和150～170mg纳米复合石墨烯水凝胶添加到20～40mL、pH＝7.4的PBS缓冲溶液中，室温避光振荡22～26h后，离心并洗涤，得到负载双重药物PTX和EPI的纳米复合石墨烯水凝胶载药体系EPI@PTX@GDL。