[发明专利]一种基于热诱导miR30‑shRNA敲低鱼类基因表达的方法在审
| 申请号： | 201610618759.5 | 申请日： | 2016-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN106191125A | 公开（公告）日： | 2016-12-07 |
| 发明（设计）人： | 裴得胜;其格乐;邓顺 | 申请（专利权）人： | 中国科学院重庆绿色智能技术研究院 |
| 主分类号： | C12N15/89 | 分类号： | C12N15/89;A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人： | 李艳;许亦琳 |
| 地址： | 400714 *** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于热诱导miR30‑shRNA敲低鱼类基因表达的方法。针对现有技术中，用于斑马鱼上的siRNA或shRNA敲低研究技术存在某些结果不能重复或效果不佳的问题，本发明采用miR30介导的shRNA基因敲低系统，构建相应的RNAi载体，通过引进热诱导调控技术，实现在热激诱导条件下控制靶基因的表达水平。结果表明，靶序如SEQ ID NO.1所示的miR30 Apex1 shRNA载体能够实现热激诱导性敲除Apex1基因表达，显著下调Apex1基因的表达。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 诱导 mir30 shrna 鱼类 基因 表达 方法 | ||
【主权项】：
一种利用miR30引导的干扰机制敲低鱼类基因表达的方法，所述方法包括：(1)提供干扰载体，所述干扰载体包括：热激启动子HSP70和miR30干扰序列；(2)构建重组载体：将目的基因干扰序列插入步骤(1)所得干扰载体，获得重组载体；(3)将步骤(2)所得重组载体注射入鱼的受精卵，进行热诱导培养，以敲低目的基因表达。
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