[发明专利]可诱导型c-myc过表达的转基因载体、转基因小鼠模型及其构建方法

摘要

本发明公开了一种可诱导型c‑myc过表达的转基因载体、转基因工具小鼠及其构建方法，c‑myc编码区与pcDNA3载体连接获得pcDNA3‑c‑myc质粒；Loxp‑Stop‑Loxp片段与pcDNA3‑c‑myc质粒连接获得pcDNA3‑Loxp‑Stop‑Loxp‑c‑myc质粒；EF1a启动子片段与pcDNA3‑Loxp‑Stop‑Loxp‑c‑myc质粒连接获得转基因载体，再以该转基因载体为基础构建转基因小鼠模型。本发明构建得到的转基因小鼠模型为可诱导的白血病模型，在没有诱导剂的情况下c‑myc不表达不发病，在诱导剂作用的情况下c‑myc过表达，引发白血病的发生，较常规的转基因小鼠模型具有更好的可控性，可根据实验需要调整需维持的种群数量。

主权项

1.一种可诱导型c‑myc过表达的转基因载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：A、以包含c‑myc ORF cDNA质粒为模板，SEQ ID No:1和SEQ ID No:2为引物，PCR扩增获得序列号为SEQ ID No:3的c‑myc编码区，XhoI和XbaI酶切c‑myc编码区和pcDNA3载体，连接获得pcDNA3‑c‑myc质粒；B、以包含Loxp‑Stop‑Loxp元件的质粒为模板，SEQ ID No:4和SEQ ID No:5为引物，PCR扩增获得序列号为SEQ ID No:6的Loxp‑Stop‑Loxp片段，EcoRI和NotI酶切Loxp‑Stop‑Loxp片段和pcDNA3‑c‑myc质粒，连接获得pcDNA3‑Loxp‑Stop‑Loxp‑c‑myc质粒；C、以pLVX‑EF1a‑ires‑puro质粒为模板，SEQ ID No:7和SEQ ID No:8为引物，PCR扩增获得序列号为SEQ ID No:9的EF1a启动子片段，BamHI和EcoRI酶切EF1a启动子片段和pcDNA3‑Loxp‑Stop‑Loxp‑c‑myc质粒，连接获得可诱导型c‑myc过表达转基因载体。