[发明专利]切花月季“卡罗拉”的微体繁殖方法

摘要

本发明公开了一种切花月季“卡罗拉“的微体繁殖方法，包括（1）外植体的选择与灭菌，（2）初代培养，（3）继代培养，（4）生根培养，（5）试管苗移栽。利用组织培养技术快速繁殖切花月季“卡罗拉”，是提高“卡罗拉”质量和数量，获得大量整齐一致的种苗的最佳方法，本发明针对“卡罗拉”的形态特征，已成功研发出用茎段为材料，进行茎段切割、消毒、初代培养、增殖培养、生根培养和试管苗移栽等一系列关键技术，解决了“卡罗拉”大规模生产的技术瓶颈。

主权项

一种切花月季“卡罗拉”的微体繁殖方法，其特征在于：所述微体繁殖方法，包括如下步骤：(1) 外植体的选择与灭菌首先选用生长季节新发的幼嫩茎段，要求生长健壮，无病虫害，无木质化，带腋芽，实验材料在自来水下冲洗30 min，边洗边用毛刷刷洗表面，在高浓度的洗涤液中浸泡20 min，自来水下冲净；在超净工作台上，先用75％酒精消毒30 S，再用0.1％升汞液消毒l0min，无菌水漂洗6次；最后用无菌滤纸吸干表面水分； (2) 初代培养用解剖刀将带腋芽的茎段切割成0.5‑0.8cm的长度，接入到1/2 MS+6‑BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20g/L +琼脂8‑10g/L的诱导培养基中，pH 5.7，茎段刚接入培养基时，要放到培养温度为15 ‑20℃的黑暗条件下培养5‑7天，然后放到光照强度为1800‑2000 Lux 的日光灯下培养30‑40 d，光照时间12h/d；（3）继代培养初代获得的芽长至1cm时，接入增殖培养基1/2 MS+6‑BA 1.0 mg/L +NAA mg/L+蔗糖20g/L +琼脂8‑10g/L，pH 5.6，每隔2‑3个月继代一次，经过反复分割继代培养，获得大量的根状茎，在光强为1800‑2000 lux 的日光灯下培养30‑40 d，温度25±1℃，光照时间12h/d；（4）生根培养到芽高长至3‑4cm时转至生根壮苗培养，放在温度25±1℃，光强2000 lux日光灯下培养2‑3个月，光照时间12h/d，在培养后期的1个月，放在温室内，生根培养基：1/2 MS+NAA0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/ L+活性炭2‑3g/L +蔗糖20g/L +琼脂8‑10g/L；（5）试管苗移栽待小苗高6‑7cm，有5‑7条根时移栽，基质填埋于根茎部位，先放在高湿、1600 lux 的弱光条件缓苗7‑10d，再放到20‑25℃，空气湿度相对70%的条件下，1‑2月喷施1/1000的营养液和抗菌剂。