[发明专利]一种利用尖吻蝮蛇毒特异蛋白制备抗血清的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种利用尖吻蝮蛇毒特异蛋白制备抗血清的方法，及在用于检测判断被尖吻蝮蛇咬伤方面的应用，首先用CM‑SEphadex C 50离子交换层析法初步纯化尖吻蝮蛇毒特异蛋白，用0.2M NaCl的0.05M pH 5.6 HAc‑NaAc洗脱获得初步纯化的尖吻蝮蛇毒特异蛋白；其次用12%PAGE制备凝胶电泳并用考马斯亮蓝染色，第二条带为获得的尖吻蝮蛇毒特异蛋白；最后将含有特异蛋白的聚丙烯酰胺凝胶磨细后直接免疫注射小鼠，间隔1周，注射4次，第4次注射后3天断头取血，血液放置6小时后离心获得抗血清。本发明可以准确鉴定是否被尖吻蝮蛇咬伤，鉴定方法简单而成熟，检测费用很低。

主权项

一种利用尖吻蝮蛇毒特异蛋白制备抗血清的方法，其特征在于包括以下步骤：a、用CM‑SEphadex C 50 离子交换层析法初步纯化尖吻蝮蛇毒特异蛋白，用0.2M NaCl 的0.05M pH 5.6 HAc‑NaAc洗脱获得初步纯化的尖吻蝮蛇毒特异蛋白；b、用12% PAGE制备凝胶电泳并用考马斯亮蓝染色，第二条带为获得的尖吻蝮蛇毒特异蛋白；c、将含有特异蛋白的聚丙烯酰胺凝胶磨细后直接免疫注射小鼠，共注射4次，每次间隔7天，第4次注射后3天断头取血，血液放置5‑7小时后离心获得抗血清。