[发明专利]老芒麦中ABA提取和测定的方法

摘要

本发明属于禾本科牧草领域，具体涉及一种老芒麦中ABA提取和测定的方法,包括下述步骤：1)标准溶液的制备,2)提取液的制备,3)测定步骤1)中的标准样品以及步骤2)中的待测液，检测采用HPLC色谱柱：色谱柱：LaChrom C18,流动相：甲醇：水：5％v/v乙酸水溶液＝80：20：5,流速：1μL/min,检测波长：264nm进样量：20μL,柱温：30℃,所述的流动相的pH值为3.8；4)老芒麦中ABA测定方法的建立。该方法操作简单，大大提高了从老芒麦幼叶中提取ABA的效率，并且摸索出了适合的流动相进行反相高效液相色谱法测定ABA含量，具有专一性、准确性和重复性，测定结果准确可靠。

主权项

一种老芒麦中ABA提取和测定的方法，其特征在于，包括下述步骤：1)标准溶液的制备:将ABA标准品以甲醇为溶剂制备成不同浓度的标准溶液，以备后用；2)提取液的制备：精确称取新鲜老芒麦幼苗，研磨成浆后转移至离心管中，用提取溶剂对浆液进行提取，提取后进行离心分离，分离后的上清液过Sep‑pak Vac C18萃取柱，收集流出液，旋干后加入色谱纯甲醇即得到老芒麦ABA的提取液，将所得提取液过0.45um滤膜，即得待测液，放入‑20℃冰箱中备用；3)测定步骤1)中的标准样品以及步骤2)中的待测液，检测采用HPLC色谱柱：色谱柱：LaChrom C18流动相：甲醇：水：5％v/v乙酸水溶液＝80：20：4‑80：20：8流速：1μL/min检测波长：264nm进样量：20μL柱温：30℃所述的流动相的pH值为3.6‑4.2；4)老芒麦中ABA测定方法的建立：取不同体积的标准品混合溶液按照色谱条件进行测定，以每个浓度下的标准溶液所得的峰面积值为纵坐标，以进样量为横坐标，建立标准曲线，计算回归方程；按照色谱条件进行测定样品的测定，根据测定样品所得的峰面积值，计算测定样品中ABA的含量。