[发明专利]一种外源性禽白血病病毒的检测方法有效
| 申请号： | 201610635653.6 | 申请日： | 2016-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN106290861B | 公开（公告）日： | 2018-08-21 |
| 发明（设计）人： | 陈顺艳;廖秋生;区伟堃;覃健萍;陈峰;林东;陈永华;农定坤 | 申请（专利权）人： | 广东温氏食品集团股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/68 |
| 代理公司： | 广州容大专利代理事务所(普通合伙) 44326 | 代理人： | 刘新年 |
| 地址： | 527400 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种外源性禽白血病病毒的检测方法，其是将生长良好的DF1细胞进行消化、稀释，传代于细胞培养板中，37℃、5％CO2培养25‑35min，至细胞培养板底部沉积45‑55％的细胞时，向细胞培养板每孔依次贴壁加入待检测鸡的血浆，培养过夜后弃掉细胞培养板中原液，加入含1％胎牛血清的维持液，继续培养7‑8天，将培养物冻存；解冻培养物，轻轻吹打混匀，加至P27抗原反应板中，检测P27抗原，判定待检测鸡是否感染外源性禽白血病病毒。相比传统方法，本发明方法对同一批样品能检测出更高的阳性率，检测出的S/P均值更高，差异极显著；且具有同等的稳定性、准确性，以及更高的灵敏性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 外源性禽 白血病病毒 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种外源性禽白血病病毒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、将生长良好的DF1细胞进行消化、用含10％胎牛血清的DMEM培养液稀释至细胞密度为(1‑1.04)×105个/ml，传代于细胞培养板中培养25‑35min,至细胞培养板底部沉积45‑55％的细胞时，向细胞培养板的每孔依次贴壁加入待检测鸡的血浆，培养过夜；(2)、弃掉细胞培养板中原液，每孔加入含1％胎牛血清的DMEM维持液，继续培养7‑8天，将培养物置于‑20℃冻存；(3)、将步骤(2)的培养物解冻，轻轻吹打混匀，加至P27抗原反应板中，检测P27抗原，判定待检测鸡是否感染外源性禽白血病病毒。
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