[发明专利]胱硫醚β-裂解修饰酶的制备方法及含胱硫醚β-裂解修饰酶试剂盒有效
| 申请号： | 201610642923.6 | 申请日： | 2016-08-08 |
| 公开（公告）号： | CN106282147B | 公开（公告）日： | 2019-08-27 |
| 发明（设计）人： | 李伟奇;李杰;房君江;张秀文;林清玉 | 申请（专利权）人： | 上海睿康生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/80 | 分类号： | C12N9/80;C12Q1/527;C12Q1/32 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 郭国中 |
| 地址： | 201112 上海市闵行区联航路1*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种胱硫醚β‑裂解酶的修饰方法和含有该修饰酶的试剂盒。该方法包括如下步骤：S1：去除胱硫醚β‑裂解酶功能性氨基酸链中的Cys的氨基酸侧链的巯基，得到胱硫醚β‑裂解酶非功能性氨基酸链；S2：切除所述胱硫醚β‑裂解酶非功能性氨基酸链中的12个氨基酸，完成修饰。该试剂盒包括试剂R1和试剂R2。本发明可使试剂盒的开封稳定性达到35天，稳定性大大提高。 | ||
| 搜索关键词： | 胱硫醚 裂解酶 试剂盒 修饰酶 氨基酸链 非功能性 裂解 修饰 功能性氨基酸 氨基酸侧链 氨基酸 巯基 去除 制备 切除 开封 | ||
【主权项】：
1.一种对胱硫醚β‑裂解酶进行修饰的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：去除胱硫醚β‑裂解酶功能性氨基酸链中的Cys的氨基酸侧链的巯基，得到胱硫醚β‑裂解酶非功能性氨基酸链；所述去除试剂为N‑(1‑芘)马来酰亚胺、甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺、聚乙二醇甲醚马来酰亚胺中的一种或几种的混合,具体为，将胱硫醚β‑裂解酶与去除试剂进行连接，胱硫醚β‑裂解酶侧链中的‑SH基团被马来酰亚胺基团取代；S2：用弹性蛋白酶切除所述胱硫醚β‑裂解酶非功能性氨基酸链中的12个氨基酸，完成修饰,具体为，将步骤S1中修饰后的胱硫醚β‑裂解酶与弹性蛋白酶进行水解，弹性蛋白酶与非功能性氨基酸链中Lys的C端发生反应，水解去除Lys之后的12个氨基酸。
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