[发明专利]一种单细胞蛋白检测系统及其应用

摘要

一种单细胞蛋白检测系统，包括微流控芯片模块、荧光激发及检测模块，以及压力控制模块，其中，所述微流控芯片模块包括一透明基底以及形成于所述基底上的压缩通道，所述压缩通道配置为其横截面积小于待测细胞的横截面积，以使细胞在压力作用下变形挤过所述压缩通道；所述荧光激发及检测模块，用于对进入压缩通道的细胞进行荧光检测；所述压力控制模块用于提供所述压力以使细胞变形通过压缩通道。以及应用该系统进行检测的方法。本发明所述方法可用来高通量定量检测单细胞蛋白。

主权项

1.一种单细胞蛋白检测系统，其特征在于，其包括微流控芯片模块、荧光激发及检测模块，以及压力控制模块，其中，所述微流控芯片模块包括一透明基底以及形成于所述基底上的压缩通道，所述压缩通道配置为其横截面积小于待测细胞的横截面积，以使细胞在压力作用下变形挤过所述压缩通道，所述压缩通道在基底一侧上还设置有一金属制作的限光窗口，该窗口宽度小于细胞变形后的长度，以限定所述荧光激发及检测模块的接收光至限光窗口所在范围内；所述荧光激发及检测模块，用于对进入压缩通道的细胞进行荧光检测；所述压力控制模块用于提供所述压力以使细胞变形通过压缩通道，其中，所述系统还包括中央控制模块，分别与所述压力控制模块和荧光激发及检测模块连接，用于控制所述压力控制模块和荧光激发及检测模块，并且对检测数据进行处理和分析；其中，所述单细胞蛋白检测系统设置成对实验数据进行采集：所述数据采集包括细胞信号检测和校准曲线绘制，细胞信号检测将已被荧光标记骨架蛋白的细胞悬液通过注射器注入沟道入口，调节压力控制器使细胞在出口负压作用下被吸入压缩通道，由于压缩沟道横截面小于细胞横截面，处于变形状态的细胞完全填充入压缩通道，并在经过限光窗口时被所述荧光激发及检测模块逐一检测；校准曲线绘制是将已知一定浓度的荧光抗试剂通过注射器注入沟道入口，并使其充满整个沟道，荧光信号通过限光窗口后被所述荧光激发及检测模块检测；所述单细胞蛋白检测系统设置成对采集数据进行处理：细胞在压缩沟道内的长度(L)与限光窗口宽度(W)的关系为：其中t_上升为荧光激发及检测模块收集到的信号上升时间，t_保持为荧光激发及检测模块收集到的信号平台时间，由此换算出细胞直径大小，再根据由标准曲线所得的荧光信号与蛋白浓度的关系，从而，得到单细胞内骨架蛋白的浓度。