[发明专利]一种利用淡水鱼头蛋白酶解制备鱼头多肽的方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种利用淡水鱼头蛋白酶解制备鱼头多肽的方法。一种利用淡水鱼头蛋白酶解制备鱼头多肽的方法，包括以下步骤：清洗、粉碎、加稀碱液、微波处理、粗过滤、酶解、灭酶活、微滤、超滤、浓缩和喷雾干燥。本发明的利用淡水鱼头蛋白酶解制备鱼头多肽的方法具有收率高、纯度高、溶剂消耗少、成本低和易于工业化生产的优点。本发明整个工艺流程短、时间短，能耗低、污染少、不使用有毒试剂、无污染物排放，达到清洁生产目标。

主权项

一种利用淡水鱼头蛋白酶解制备鱼头多肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取出鲜淡水鱼头或解冻的冰冻淡水鱼头，用纯净水洗净表面的污物、血水及杂质，摘除鱼鳃，机械粉碎至20目，得鱼头浆液；(2)按鱼头浆液与纯净水重量比为1:8混合后，用胶体磨研磨匀浆，用NaOH溶液调pH值至9.0，得到调节好的鱼头匀浆液；(3)将调节好的鱼头匀浆液置于带搅拌装置的微波罐中，先微波升温至60℃，持续保温60min；(4)冷却至40℃，添加按分离蛋白质量5％的胰蛋白酶，在胶体磨中匀浆循环，当pH值下降至7.5时，取酶解液检验肽含量达到≥15mg/ml时；结束酶解；当酶解液含肽量＜15mg/ml时，将酶解液置于微波罐中进行微波辅助酶解，微波时间15‑20min。温度55‑60℃；(5)结束酶解，启动微波罐最大微波功率，将酶解液升温至85℃时，保持5‑10min，灭酶活完成，得到已灭酶活的酶解液；(6)将已灭酶活的酶解液排出，酶解液温度降至低于50℃时，边搅拌边加入用15％醋酸溶解1.5％壳聚糖溶液，调节pH值至4.8‑5.0，沉析未酶解的脑蛋白、磷脂及其它大分子杂质；沉析物用400目滤布离心，过滤，去除沉淀，得到离心液；(7)将步骤(6)所得的离心液，用0.45um中空纤维膜进行微滤，滤液用能拦截分子量10000Da的超滤膜过滤，透过液即为淡水鱼脑多肽溶液，若只做多肽时，将此溶液减压浓缩，然后冷冻干燥，即得多肽粉；(8)当要制备小分子脑肽时，将多肽液进一步用能拦截分子量1000Da的纳滤膜过滤，滤液再用RO膜浓缩，将浓缩液冷冻，干燥，即得到小分子脑肽。