[发明专利]一种以聚氨基酸修饰的聚苯乙烯树脂为载体的固定化酶及其制备方法有效
申请号: | 201610658506.0 | 申请日: | 2016-08-12 |
公开(公告)号: | CN106222157B | 公开(公告)日: | 2019-02-22 |
发明(设计)人: | 姚忠;张凡;朱颐申;孙芸;朱本伟 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N11/08 | 分类号: | C12N11/08 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 肖明芳 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种以聚氨基酸修饰的聚苯乙烯树脂为载体的固定化酶,包括酶和固定所述酶的载体;其中,所述的酶为β‑葡萄糖苷酶;所述的载体为聚氨基酸修饰的氨甲基聚苯乙烯树脂颗粒,所述的聚氨基酸,其氨基酸序列为:Arg‑Asp‑Glu‑Glu‑Lys‑Lys‑Asp‑Asp‑Asp‑Asp,氨基酸序列中的羧基端氨基酸Asp与树脂上的氨甲基脱水缩合形成肽键相连。本发明采用上述聚氨基酸修饰的聚苯乙烯树脂为载体固定化β‐葡萄糖苷酶,由于载体表面的电荷环境与β‐葡萄糖苷酶的最适pH值(约为4.5左右)相近,其表面的扩散双电层对酶分子结构具有保护作用,显著提高了固定化酶的操作稳定性。 | ||
搜索关键词: | 一种 氨基酸 修饰 聚苯乙烯 树脂 载体 固定 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种以聚氨基酸修饰的聚苯乙烯树脂为载体的固定化酶,其特征在于,包括酶和固定所述酶的载体;其中,所述的酶为β‑葡萄糖苷酶;所述的载体为聚氨基酸修饰的氨甲基聚苯乙烯树脂颗粒,所述的聚氨基酸,其氨基酸序列为:Arg‑Asp‑Glu‑Glu‑Lys‑Lys‑Asp‑Asp‑Asp‑Asp,氨基酸序列中的羧基端氨基酸Asp与树脂上的氨甲基脱水缩合形成肽键相连;所述的以聚氨基酸修饰的聚苯乙烯树脂为载体的固定化酶按如下步骤制备得到:步骤一、载体的制备:采用多肽固相合成法,将聚氨基酸修饰物与氨甲基聚苯乙烯树脂偶联得到载体;步骤二、固定化酶的制备:将载体加入β‑葡萄糖苷酶溶液中,低温振荡反应1~3h,将液体滤出,用缓冲液淋洗,抽干后即得。
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