[发明专利]一种用于培养间充质干细胞的试剂盒及培养方法

摘要

本发明提供了一种用于培养间充质干细胞的试剂盒及培养方法，所述试剂盒包括盒体和与所述盒体铰接的盒盖，所述盒体内横向设有隔板，所述盒体内分为试剂存放盒和工具盒，所述工具盒内设有抽拉盒，所述试剂存放盒内设有若干试剂瓶，若干所述试剂瓶内分别盛放有脐带保存液、培养液、添加剂、生长因子Ⅰ、生长因子Ⅱ、消化液、洗涤液、冻存液。本发明提供的试剂盒结构简单，其专门用于培养间充质干细胞，提高了间充质干细胞的培养效率，能够大批量培养较多的间充质干细胞，能够满足人们需求，节省了经济成本，同时，本发明提供的试剂盒中的试剂配方合理有效，能够满足间充质干细胞生长的营养需求，有效促进间充质干细胞的增值生长，提高了细胞存活率。

主权项

1.一种用于培养间充质干细胞的试剂盒，包括盒体(1)和与所述盒体(1)铰接的盒盖(2)，其特征在于，所述盒体(1)内横向设有隔板(3)，所述盒体(1)内通过所述隔板(3)由上到下划分为试剂存放盒(4)和工具盒(5)，所述工具盒(5)内设有用于放置采集或培养间充质干细胞所需工具的抽拉盒(6)，所述抽拉盒(6)与所述工具盒(5)滑动连接，所述试剂存放盒(4)内设有若干试剂瓶(7)，若干所述试剂瓶(7)内分别盛放有脐带保存液、培养液、添加剂、生长因子Ⅰ、生长因子Ⅱ、消化液、洗涤液、冻存液；所述消化液主要由胰酶、透明质酸酶、糖苷酶和EDTA用PBS缓冲液溶解而成，每mL所述PBS缓冲液分别溶解胰酶20‑30U、透明质酸酶15‑25U、糖苷酶18‑22U、EDTA3‑6mg，所述PBS缓冲液的浓度为100‑120mmol/L；所述生长因子Ⅰ为浓度为10ng/mL的bFGF溶液，所述生长因子Ⅱ为浓度为10ng/mL的EGF溶液；所述试剂存放盒(4)内设有容纳筐(8)，所述容纳筐(8)内纵向设有挡板(9)，所述容纳筐(8)通过所述挡板(9)划分为置物仓(10)和试剂仓(11)，所述置物仓(10)内设有衬垫(12)，所述衬垫(12)上开有通孔，所述通孔内插接用于盛放试剂的试管，所述衬垫(12)上还设有置物槽，所述置物槽内放置有培养皿；若干所述试剂瓶(7)均放置在所述试剂仓(11)内，所述试剂瓶(7)一侧设有凸筋(13)，其另一侧设有与所述凸筋(13)适配的凹槽(14)，相邻所述试剂瓶(7)之间通过所述凸筋(13)和所述凹槽(14)卡接；所述试剂存放盒(4)内侧壁上设有隔台(15)，所述容纳筐(8)顶部边缘向外延伸连接凸板(16)，所述凸板(16)搭接在所述隔台(15)；所述容纳筐(8)顶部边缘对称设有提手(17)；所述试剂存放盒(4)内位于所述容纳筐(8)底部设有冰袋(18)；所述脐带保存液主要由吉米沙星、转铁蛋白、2′,3′‑二脱氧腺苷‑5‑三磷酸酯、卡那霉素和妥布霉素用α‑MEM培养基水溶液溶解而成，每mL所述α‑MEM培养基水溶液分别溶解吉米沙星10‑18mg、转铁蛋白5‑8mg、2′,3′‑二脱氧腺苷‑5‑三磷酸酯1‑3mg、卡那霉素50‑70U、妥布霉素45‑65U，所述α‑MEM培养基水溶液的浓度为8‑12mg/mL；制备所述脐带保存液还包括乳酸、白屈菜提取物和鸡血七，每mL所述α‑MEM培养基水溶液分别溶解乳酸0.005‑0.01mmol、白屈菜提取物1‑5mg、鸡血七2‑3mg；所述添加剂主要由以下重量份数的成分制备而成：胆钙化醇25‑45份、左旋肉碱10‑25份、葡萄糖酸‑δ‑内酯25‑35份、纤维素35‑45份、D‑(+)‑吡喃葡萄糖15‑30份。