[发明专利]一种以任豆叶片为外植体的高效再生方法

摘要

本发明公开一种以任豆叶片为外植体的高效再生方法，属于植物组织培养技术领域。本发明以叶片为材料研究任豆再生体系，旨在提高任豆再生能力，建立高效的再生体系，为之后种质资源保护和基因工程研究提供有效的参考价值。本发明的高效组织培养和植株再生方法，可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的任豆组培幼苗。任豆叶子作为取材材料，与已经报道的胚轴、一年生枝条作为外植体构建再生体系相比，具有操作方便、取材广泛、可重复性强及效率高等优势。该方法不仅能满足市场对种苗的需求，并且可以通过转基因研究对任豆种质资源进行改良和创新，为任豆种质资源可持续利用奠定基础。

主权项

1.一种以任豆叶片为外植体的高效再生方法，其特征在于包括如下步骤：(1)芽团的诱导及伸长：选取无菌苗的叶片为外植体，将外植体接种到芽诱导培养基中诱导不定芽，接种时叶片远轴面朝上；培养至叶片上开始有芽点出现，将外植体转移到不定芽伸长培养基中诱导不定芽伸长；(2)生根培养：待不定芽伸长到3～4cm时，切取不定芽，接种于生根培养基中诱导生根；步骤(1)中所述的芽诱导培养基为MS+6‑BA 2.0～4.0mg/L+2,4‑D 0.01～0.03mg/L+IBA 0.01～0.02mg/L+蔗糖28～35g/L+琼脂4.5～5.5g/L；pH为5.8～6.0；步骤(1)中所述的不定芽伸长培养基为MS+6‑BA 0.5～1.6mg/L+IBA 0.01～0.03mg/L+蔗糖28～35g/L+琼脂4.5～5.5g/L；pH为5.8～6.0；步骤(2)中所述的生根培养基为MS+NAA 0.01～0.02mg/L+蔗糖28～35g/L+琼脂4.5～5.5g/L；pH为5.8～6.0。