[发明专利]一种生物生产羟基酪醇的方法在审
申请号: | 201610662962.2 | 申请日: | 2016-08-10 |
公开(公告)号: | CN107723306A | 公开(公告)日: | 2018-02-23 |
发明(设计)人: | 赵广荣;马雅婷 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;C12P7/22;C12R1/19 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所12201 | 代理人: | 陆艺 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种生物生产羟基酪醇的方法,包括如下步骤全化学合成带trc启动子的酮基脱羧酶基因kdc和带tac启动子的4‑羟基苯乙酸‑3‑单加氧酶基因hpaBC,全化学合成载体骨架pBPE004,用酶切连接的方法将kdc和hpaBC连接到pBPE004上得到重组载体pKB,将pKB转入底盘菌株SyBE‑002447中,得到SyBE‑KB1菌株;将kdc基因和hpaBC基因整合至SyBE‑002447染色体上,得到SyBE‑KB2菌株。以葡萄糖为前体,对SyBE‑KB1和SyBE‑KB2菌株进行发酵生产羟基酪醇。本发明使用工程大肠杆菌生产羟基酪醇,可解决羟基酪醇的来源问题,降低成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 生物 生产 羟基 方法 | ||
【主权项】:
一种产羟基酪醇的重组菌的构建方法,其特征是包括如下步骤:(1)人工全合成带trc启动子的酮基脱羧酶基因kdc,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;人工全合成带tac启动子的4‑羟基苯乙酸‑3‑单加氧酶基因hpaBC,其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;全合成载体骨架pBPE004,其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;(2)将SEQ ID No.1所示核苷酸序列和SEQ ID No.2所示核苷酸序列通过酶切连接方式与SEQ ID No.3所示核苷酸序列连接,筛选阳性克隆得到重组载体pKB;(3)将重组载体pKB转化到宿主菌SyBE‑002447中,得到产羟基酪醇的重组菌SyBE‑KB1菌株。
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