[发明专利]一种研究棉铃虫幼虫RNA干扰效率的方法有效
| 申请号： | 201610664530.5 | 申请日： | 2016-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN106222286B | 公开（公告）日： | 2019-06-18 |
| 发明（设计）人： | 魏纪珍;张江;梁革梅 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 430062 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种研究棉铃虫幼虫RNA干扰效率的方法。本发明通过对饲喂棉铃虫幼虫siRNA的方法进行改进，建立一种研究棉铃虫幼虫RNA干扰效率的方法，提高对鳞翅目昆虫棉铃虫的RNA干扰效率，稳定实验结果。该方法高效、简单，可操作性强，具体了siRNA的用量，可重性强，为研究鳞翅目昆虫棉铃虫基因的功能提供技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 研究 棉铃虫 幼虫 rna 干扰 效率 方法 | ||
【主权项】：
1.一种研究棉铃虫幼虫RNA干扰效率的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、在生物测定板的小孔中放入8～10mg棉铃虫人工饲料，滴加浓度为0.08～0.16μg/μL的siRNA溶液，得到含有0.2～0.4μg siRNA的人工饲料，所述siRNA溶液的滴加量为2.0～2.5μL；S2、将棉铃虫幼虫饥饿处理12小时后，置于S1所述的小孔中，每孔一头；S3、6小时后，将S1制备的含有0.2～0.4μg siRNA的人工饲料重复喂食一次；S4、重复喂食12小时后，检测棉铃虫幼虫中靶基因的表达量；所述棉铃虫幼虫为刚完成蜕皮后的3龄幼虫；所述靶基因为ABCC2基因，所述siRNA的核苷酸序列为：GGTGTTTACGGCGTTCCTT。
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