[发明专利]SH3结构域非典型配体及其制备方法在审

专利信息
申请号: 201610670044.4 申请日: 2016-08-15
公开(公告)号: CN106191100A 公开(公告)日: 2016-12-07
发明(设计)人: 李嫄;高友鹤;宋春霞;杨帆;马素参 申请(专利权)人: 李嫄
主分类号: C12N15/81 分类号: C12N15/81;C07K7/06;A61K38/08;A61P35/00
代理公司: 北京华创博为知识产权代理有限公司 11551 代理人: 张波涛;管莹
地址: 102488 北京市房*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明针对SH3结构域非典型配体分离鉴定的技术难题,提供一种SH3结构域非典型配体的制备方法,具体包括构建简并随机肽库、构建重组SH3结构域表达载体、肽库选择、阳性克隆测序、序列多重比对分析、配体基序验证等。本发明通过实施上述方法,制备了一系列SH3结构域非典型配体,确定其保守基序为LxLLFF,进而通过免疫沉淀和免疫印迹证实了非典型配体肽与SH3结构域在细胞内相互结合。本发明所述方法及获得的配体为SH3结构域的功能研究、及以构效关系为基础的药物设计等提供依据。
搜索关键词: sh3 结构 非典型 及其 制备 方法
【主权项】:
一种SH3结构域非典型配体的制备方法,其特征在于包括以下步骤:步骤一:构建密码子简并的随机肽库;步骤二:构建SH3结构域表达载体,转入宿主细胞;步骤三:肽库选择,获得能够结合SH3结构域的肽;步骤四:序列比对,获得SH3结构域配体的肽基序;步骤五:基序验证,挑选含有所述肽基序的典型阳性肽验证其与SH3结构域的结合能力。
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