[发明专利]一种人间充质干细胞培养上清液冻干粉的制备方法及制得的冻干粉有效
| 申请号： | 201610680823.2 | 申请日： | 2016-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN106244652B | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 张龙;吴延恒 | 申请（专利权）人： | 广州宏柯源生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;A01N1/02 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;宋静娜 |
| 地址： | 510000 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种诱导人间充质干细胞生产干细胞因子的方法；本发明还公开了一种人间充质干细胞培养上清液冻干粉的制备方法及制得的冻干粉。本发明的诱导人间充质干细胞生产细胞因子的方法诱导效率高、干细胞因子产量大，可短时间内获得大量的干细胞因子；本发明的人间充质干细胞培养上清液冻干粉的制备方法简单、方便，相较于未低温诱导的方法，其产量提高了15％‑20％；发明人间充质干细胞培养上清液冻干粉的制备方法所制备的冻干粉最大程度上保存了人间充质干细胞培养上清中的各种具有生物活性的细胞因子混合物，为人间充质干细胞培养上清液的在美容等方面的应用奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 人间 干细胞 培养 上清液冻 干粉 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种人间充质干细胞培养上清液冻干粉的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)获取人间充质干细胞：将脐带组织剪碎，用0.1％I型胶原酶消化，制备细胞悬浮液，并将其离心，用获得的细胞沉淀进行培养，37℃、饱和湿度、5％CO2条件下，培养5～7天，得到原代人脐带间充质干细胞；原代细胞采用低传代方法传代培养人间充质干细胞，在传代细胞融合度为70％～80％时收集人间充质干细胞；(2)将步骤(1)制备的人间充质干细胞重悬于生理盐水，在2～10℃的低温下、饱和湿度5％CO2条件下进行增殖性培养；(3)收集所述步骤(2)培养上清液，浓缩、冻干后，即得人间充质干细胞培养上清液冻干粉。
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