[发明专利]莱比托游动球菌催化制备丹参素的方法

摘要

一种采用莱比托游动球菌生产R‑(+)‑3‑(3,4‑二羟基苯基)‑2‑羟基丙酸(D‑丹参素)的方法，属于生物工程技术领域。本发明莱比托游动球菌，将底物(肉桂酸、肉桂醛、肉桂醇、L‑多巴、L‑酪氨酸、L‑苯丙氨酸)催化制备成D‑丹参素。具体地有两种催化工艺：(A)在液态发酵过程中将底物加入到发酵液中；或(B)通过液态发酵培养得到细胞，将细胞放在反应体系中催化底物。本发明具有良好的工业应用前景。

主权项

一种莱比托游动球菌催化生产D‑丹参素的方法，其特征在于以莱比托游动球菌Planococcus rifietoensis ATCC BAA‑790为出发菌株，催化过程采用两种工艺：工艺A)细胞的液态培养过程，将底物加入培养体系中进行；或工艺B)将液态发酵培养得到的细胞放入含有底物的反应体系中进行，工艺为：工艺A)细胞的液态培养过程，将底物加入培养体系中进行：底物添加量为0.1‑10g/L；或工艺B)将液态发酵培养得到的细胞放入含有底物的反应体系中进行：通过液态培养得到细胞，将发酵液离心(转速10000rpm，时间10min)，去除上清液获得菌体，离心获得的菌体用无菌水清洗一遍后再次离心(转速10000rpm，时间10min)得到湿菌体，将处理过的细胞以1‑50g/L量加入反应体系中，底物浓度控制在0.1‑10g/L，反应体系pH4‑8，反应温度20‑35℃；所述工艺A)或工艺B)的液态发酵培养基组成为：碳源5‑50g/L，氮源55‑50g/L，磷酸氢二铵2g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸镁0.5g/L；在发酵罐内装入发酵罐体积70％的培养基，灭菌冷却后接入莱比托游动球菌，接种量为10％，起始pH5‑8，发酵温度为25‑35℃，发酵周期为24‑72小时。本方法所用底物选用肉桂酸、肉桂醛、肉桂醇、L‑多巴、L‑酪氨酸或L‑苯丙氨酸。