[发明专利]一种昆虫病原线虫一级种源制备方法

摘要

本发明公开了一种昆虫病原线虫一级种源制备方法，其特征在于：具体步骤包括：材料器材准备，配制培养基，大蜡螟幼虫灭菌，配制线虫液，接种，观察记录，获取线虫一级种源。本发明通过大蜡螟活体培养，经表面消毒后得到的线虫一级种源可以解决种虫退化问题，降低生产成本，发展前景好，对昆虫病原线虫的规模化生产和对地下害虫的生物防治具有非常重要的意义。

主权项

一种昆虫病原线虫一级种源制备方法，其特征在于：具体步骤包括：(a)准备材料：大蜡螟幼虫、胰蛋白、酵母粉、NaCl、琼脂粉、水、线虫液、安替福民，准备器材：培养皿、镊子、滤纸、超净工作台、灭菌锅、移液枪、枪头、酒精灯、三角瓶、筛网；用牛皮纸将镊子、枪头、培养皿、三角瓶、筛网包好后进行灭菌处理；(b)配制菌种培养基，灭菌处理后，倒入培养皿中；(c)培养皿中垫上滤纸，每个培养皿中放入10条大蜡螟幼虫，用牛皮纸包住培养皿，灭菌处理；(d)对灭菌后的大蜡螟虫体表面及虫体内部划平板法监测灭菌效果，配制线虫液，取线虫液1.5ml接种到灭菌后的大蜡螟幼虫的培养皿中，每天观察并记录大蜡螟体色变化；(e)接种后第八天，对大蜡螟虫体表面及虫体内部划平板法监测灭菌效果，将大蜡螟取出放到灭菌后的空三角瓶，加入安替福民溶液侵泡15分钟，用灭菌水洗净大蜡螟体表的安替福民；(f)获取线虫液并计数，取线虫液划平板法，检测线虫液是否有杂菌；若无杂菌，此线虫液为一级线虫种，将取得的一级种虫解剖，通过划平板法分离取得初生型杆菌。