[发明专利]一种高效分离纯化高纯度甘草酸的方法

摘要

本发明提供了一种从甘草中高效分离纯化高纯度甘草酸的方法。具体为甘草提取液经浓缩后得到的甘草酸提取物，经亲水固相萃取(SPE)后得到甘草酸粗品，粗品经过一步反相制备高效液相色谱得到甘草酸纯品。本发明的特点在于：本发明制备了高纯度的甘草酸；经过SPE处理，甘草酸的含量从提取液中的13％提高到了甘草酸粗品中的64％，大大简化了样品的复杂程度，为样品的进一步纯化创造了有利条件；SPE单次处理量大、效率高，适用于目标物质的预处理和富集；反相制备色谱可以得到纯度99％的甘草酸，且利于工业化生产。

主权项

一种高效分离纯化高纯度甘草酸的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)甘草酸提取物的制备：将甘草根和/或根茎粉碎成粗粉，按1g：10～50mL用50％～95％(V/V)乙醇溶液超声提取1～5次，每次超声时间为3～5小时，每次提取后均过滤，滤渣再进行或不进行下一次的超声提取过程，过滤后合并滤液，浓缩至固含量为1mg/mL～1g/mL，得甘草酸提取物；(2)甘草酸粗品的制备：将亲水SPE柱(填料为Click XIon、XAmide和UPS中的一种)用2～20倍柱体积50％～95％(V/V)乙醇活化、平衡后，取步骤(1)所得的甘草酸提取物上样至上述平衡好的SPE柱，用2～20倍柱体积50～80％(V/V)乙醇溶液淋洗，上述活化、平衡、上样和淋洗步骤均应加甲酸调节pH为3～5，同时加入一定量缓冲盐，缓冲盐应为碳酸氢铵、甲酸铵、磷酸二氢钠中的一种，盐浓度应为1mM～20mM，最后用4～10倍柱体积20％～80％(V/V)乙醇溶液洗脱，洗脱液中加入有盐酸、甲酸和三氟乙酸中的一种，终体积浓度为0.1％～10％，洗脱液旋蒸浓缩后冻干，得甘草酸粗品；(3)甘草酸纯品的制备：步骤(2)所得的甘草酸粗品用20％～80％(V/V)乙醇溶解至固含量为1mg/mL～1g/mL，用反相制备高效液相色谱仪在乙醇‑水条件下纯化，样品浓缩冻干后，得甘草酸纯品。