[发明专利]一种卤醇脱卤酶催化合成（R）‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯的制备方法

摘要

本发明涉及一种卤醇脱卤酶催化合成(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯的制备方法，以(S)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯(ATS‑4)为底物，采用酶法合成(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯(ATS‑5)，针对酶法反应速率和转化率低的缺陷，选取树脂为载体，吸附卤醇脱卤酶，并将转化率为50％的反应体系导入精馏装置中，缩短酶在反应体系中的停留时间，减少了的酶的失活，有利于酶的回收再利用，酶的利用率得到提高。本发明反应条件温和，反应速度快，成本低，操作稳定性好，转化率高，可达98.8％‑99.4％；没有副反应存在，制得的产物光学纯度高，适合工业化生产。

主权项

一种卤醇脱卤酶催化合成(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯的制备方法，包括如下步骤：1)配制卤醇脱卤酶溶液，将吸附树脂加入到卤醇脱卤酶溶液中，并在15‑30℃下搅拌3‑5h，使得卤醇脱卤酶吸附到吸附树脂上；2)将戊二醛水溶液滴入到步骤1)的卤醇脱卤酶溶液中，在温度为20‑35℃下，搅拌反应3‑5h，得固定液，将吸附树脂从酶溶液中分离出来，洗涤得到固定化卤醇脱卤酶；3)称取210g蒸馏水、1.5‑2.5g氰化钠，逐一加入到不锈钢反应釜中，并调节pH至7.5‑8.5；4)加入40‑50g底物(S)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯(ATS‑4)，并升温，待温度为45‑55℃时加入吸附树脂固定卤醇脱卤酶，调节pH至6.90‑7.05，用气相色谱实时检测反应转化率；5)待步骤4)的转化率达到50％时，将混合液与固定化卤醇脱卤酶过滤分离，固定化卤醇脱卤酶再加入反应釜，混合液进入分层装置，上层进入精馏装置中，精馏装置下部得到(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯，未反应的原料从上部流回入反应釜中继续反应，如此循环反应，得到高转化率的(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯(ATS‑5)。