[发明专利]入门载体pAmpGate和pGentGate的构建及使用方法有效
| 申请号： | 201610700818.3 | 申请日： | 2016-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN106222186B | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 张孟臣;娜仁;杨春燕;闫龙;史晓蕾;邸锐;赵鑫;冯燕 | 申请（专利权）人： | 河北省农林科学院粮油作物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/65 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;张立娜 |
| 地址： | 050035 河北*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明公开了入门载体pAmpGate和pGentGate的构建及使用方法。本发明所提供的入门载体为含有DNA片段A的环形载体；所述DNA片段A自5’端到3’端依次含有attL1序列、IIs型限制性内切酶A的识别序列、IIs型限制性内切酶B的识别序列、筛选标签序列1、所述IIs型限制性内切酶B的识别序列、所述IIs型限制性内切酶A的识别序列、attL2序列。本发明所提供的入门载体可采用Golden Gate构建方法取代传统的BP反应进行入门克隆的构建，由经济实惠的IIS型限制性核酸内切酶和DNA连接酶取代昂贵的BP酶，大大节省了实验费用，同时该入门载体既可以用来进行单片段DNA重组克隆，又可以进行多片段高效“无逢”拼接，在实际研究中非常经济便捷。 | ||
| 搜索关键词： | 入门 载体 pampgate pgentgate 构建 使用方法 | ||
【主权项】：
1.入门载体，为含有DNA片段A的环形载体；所述DNA片段A自5’端到3’端依次含有attL1序列、IIs型限制性内切酶A的识别序列、IIs型限制性内切酶B的识别序列、筛选标签序列1、所述IIs型限制性内切酶B的识别序列、所述IIs型限制性内切酶A的识别序列、attL2序列。
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