[发明专利]一种胚胎显微注射siRNA完全沉默目的基因的方法在审
| 申请号： | 201610717419.8 | 申请日： | 2016-08-24 |
| 公开（公告）号： | CN106350542A | 公开（公告）日： | 2017-01-25 |
| 发明（设计）人： | 郭镇华;吕蕾;赛福;杨云春;付博;刘自广;汪亮;彭福刚 | 申请（专利权）人： | 黑龙江省农业科学院畜牧研究所 |
| 主分类号： | C12N15/89 | 分类号： | C12N15/89 |
| 代理公司： | 北京高航知识产权代理有限公司11530 | 代理人： | 赵永强 |
| 地址： | 150086 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种胚胎显微注射siRNA完全沉默目的基因的方法，包括以下步骤；S1将受精6h之后的卵母细胞移出，转入含有透明质酸酶的脱卵丘液中，静置1min；S2将卵母细胞转移至显微镜下，脱去卵母细胞中的颗粒细胞，将去除颗粒细胞的卵母细胞用卵母细胞洗涤液清洗3次；S3用注射针吸取20pl目标液体，并在显微镜下将注射针的针头刺入卵母细胞中，抽吸卵母细胞，使卵母细胞的细胞膜破坏，卵母细胞的细胞膜破坏完成后再快速注入目标液体，注射成功的标志是显微镜下可以观察到胚胎内容物扩张，即完成一个卵母细胞的注射。本发明提供的胚胎显微注射的方法，能够确保胚胎显微注射的成功率达到100％，使siRNA完全沉默目的基因。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 胚胎 显微 注射 sirna 完全 沉默 目的 基因 方法 | ||
【主权项】：
一种胚胎显微注射siRNA完全沉默目的基因的方法，其特征在于，包括以下步骤；S1：将受精6h之后的卵母细胞移出，转入含有透明质酸酶的脱卵丘液中，静置1min；S2：将卵母细胞转移至显微镜下，脱去卵母细胞中的颗粒细胞，将去除颗粒细胞的卵母细胞用卵母细胞洗涤液清洗3次；S3：用注射针吸取20pl目标液体，并在显微镜下将注射针的针头刺入卵母细胞中，抽吸卵母细胞，使卵母细胞的细胞膜破坏，卵母细胞的细胞膜破坏完成后再快速注入目标液体，即完成一个卵母细胞的注射。
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