[发明专利]一种保健酒中总皂苷含量的测定方法

摘要

本发明提出了一种保健酒中总皂苷含量的测定方法，包括以下步骤：S1校准溶液的制备和显色，S2酒样溶液的制备和显色，以及S3酒样中总皂苷的含量计算。其中S1校准溶液的制备和显色，S2酒样溶液的制备和显色操作过程中，首先将皂苷水解成苷元，消除了糖基对香草醛显色剂的干扰，采用液液萃取方式提取苷元的同时除去了酒样中的干扰色素。本发明方法具有线性关系良好、准确度高、精确度好、重复性效果良好等优点，因此非常适合用于保健酒中总皂苷含量的定量分析和质量控制。

主权项

1.一种保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：校准溶液的制备和显色S101水解：往乙腈和盐酸的混合溶剂中加入人参皂苷Re甲醇溶液，混匀后于恒温水浴条件下进行水解；S102萃取：水解产物冷却后加入二氯甲烷和去离子水，水洗分离去掉水层，经氮吹仪吹干有机相层；S103校准溶液配制：将萃取吹干后的产物用乙腈溶解和定容，得到人参皂苷苷元校准溶液；S104测定吸光度：取人参皂苷苷元校准溶液加入到香草醛硫酸显色中间溶液中，显色体系中人参皂苷苷元校准溶液的浓度记为C标，测定人参皂苷苷元校准溶液的吸光度值，该吸光度值记为A标；S2：酒样溶液的制备和显色S201皂苷的提取：将保健酒酒样挥干乙醇和水，所得固体用水溶解，将该溶液进行固相萃取和洗脱，收集洗脱液，除去溶剂，所得固体用甲醇溶解，获得酒样皂苷甲醇溶液；S202水解：往乙腈和盐酸的混合溶剂中加入酒样皂苷甲醇溶液，混匀后于恒温水浴条件下进行水解；S203萃取：将水解产物冷却后加入二氯甲烷和去离子水，水洗分离去掉水层，经氮吹仪吹干有机相层；S204酒样溶液的配制：将萃取吹干后的产物用乙腈溶解并定容至V1mL，得到酒样苷元乙腈溶液；S205测定吸光度：吸取V2mL酒样苷元乙腈溶液加入到V3mL的香草醛硫酸显色中间溶液中，测定酒样苷元乙腈溶液的吸光度，该吸光度值记为A样；S3：酒样中总皂苷的含量计算计算公式为：式中，X表示酒样中总皂苷的含量，单位为mg/100mL；A标表示紫外分光光度计测定的校准溶液的吸光度值；A样表示紫外分光光度计测定的样品吸光度值；C标表示显色体系中校准溶液的浓度，单位为μg/mL；946.55为人参皂苷Re的摩尔分子量，单位为g/mol；476.73为人参皂苷水解成苷元的摩尔分子量，单位为g/mol；步骤S101和S202的水解过程中，恒温水浴温度为80℃，时间为3小时；步骤S101和S202的水解过程中，乙腈和盐酸的体积比为1:1；其中，所述步骤S104的测定吸光度过程中，取人参皂苷苷元校准溶液加入到香草醛硫酸显色中间溶液中，混匀得到校准显色组；同时吸取乙腈加入到香草醛硫酸显色中间溶液中，混匀得到溶剂空白显色组；所得校准显色组和溶剂空白显色组于70℃水浴加热10分钟后迅速放入冰水中冷却，后检测溶液在最大吸收波长下的吸光度值；所述步骤S201皂苷的提取过程中，将保健酒酒样水浴挥干乙醇和水，所得固体用水溶解，将该溶液加入经激活的萃取小柱中萃取，然后用去离子水洗涤，保持1～2滴/秒的速度洗涤，再分别用70％甲醇水溶液和甲醇进行洗脱，收集洗脱液，除去甲醇和水，所得固体用甲醇溶解，获得酒样皂苷甲醇溶液；所述步骤S205的测定吸光度过程中，取酒样苷元乙腈溶液加入到的香草醛硫酸显色中间溶液中，混合均匀，所得混合物于70℃水浴加热10分钟后迅速放入冰水中冷却，后检测溶液在最大吸收波长下的吸光度值。